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食品及饮料行业

恒温荧光法试剂盒快速筛选、鉴定创伤弧菌解决方案

一、技术原理:

    试剂盒基于恒温荧光法检测,利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构,引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应,实现在恒温条件下(60-65℃)进行连续快速扩增。

    反应体系中加入了显色指示剂,阴阳性结果显色差异显著,扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果,无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。恒温荧光法是一种新型的恒温核酸扩增技术,该技术无需常规PCR中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求,只需提供一个适宜的恒定温度即可,因此,与常规PCR相比,恒温荧光法技术更适合现场高通量快速检测,具有简单、快速、特异性强的特点。

二、环凯恒温荧光法试剂盒特点

    快速简便 将酶、引物等反应组分混匀后进行干粉化处理,增加试剂稳定性,使用时减少溶液配制步骤,更为便捷,整个检测反应可在1 h内完成;

    判读简单 反应前加入显色指示剂,反应后通过肉眼观察反应液颜色变化或者经荧光监测仪器跟踪荧光图谱的变化判读结果,直观方便,且可有效避免反应后开盖造成的气溶胶污染。

    特异性高 利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引物,保证扩增反应的高度特异性;

    灵敏度高 最低检验限达到18 CFU/Test;

恒温荧光法检测试剂盒

三、环凯恒温荧光法试剂盒组成

    1)试剂盒组成

组分编号

组分名称

规格×数量

DRL08

检测试剂(冻干)

3排× 8管

FRL04

复溶液

650 μL × 1管

PRL08

阳性对照(冻干)

1管

SHR01

阴性对照(冻干)

1管

SHR02

裂解液

1 mL × 1管

SHR03

显色指示剂

80 μL×1管

SHR04

超纯水

1 mL×1管

 

说明书

1份


    2)检测结果

四、环凯恒温荧光法试剂盒操作流程

 

恒温荧光法试剂盒

 

五、创伤弧菌快速筛选操作流程

恒温荧光法检测

六、需要配套的仪器及耗材列表

 

所需仪器

规格

备注

侧边过滤样品均质袋

容量400ml,袋子规格190*300mm

采用过滤袋可显著减少样品残渣,利于微生物的分离及DNA的提取。

可调移液器

1-10 μL、10-200 μL和100-1000 μL各一把

 

高速振荡样品前处理器

 ShockMixer-1;

均质频率93次/s,相比拍击均质器9次/s的均质频率,高速振荡样品前处理器能产生高频脉冲波,有更好的微生物释放率;

更少的破袋率、更广的样品适用性:无需打碎样品,不会导致样品处理袋的破裂,样品适用性更广;

可预设均质时间(1-12分钟)

固体食品样品均质之用。

 

 

 

 

 

 

高速离心机

 最高转速:16500

最大离心力(×g):18780

最大容量:12×10ml

控制及驱动系统:交流变频电机,微机控制,直接驱动

 

恒温金属浴

温度设定范围:0℃~100℃

升温时间:≤8min(室温20℃~100℃)

降温时间:≤8min(100℃~4℃)

温度波动度:≤±0.1℃ 温度均匀性:≤±0.5℃

 

 

 


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