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四环素检定培养基

商品类别:药品、生物制品检验系列

货 号 :022182

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规 格 :100g

浏览次数:114次

添加日期:2014-01-14

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022182 四环素检定培养基

(Tetracyline Examination Agar)

用 途:

四环素检定培养基用于四环素族残留的一种微生物学检定(GB/T9695.16-88和SN0179-92)。

原 理:

本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价或样品中四环素残留的一种微生物学方法。

配方(每升):

胰蛋白胨

6g

牛肉膏粉

1.5g

酵母膏粉

3g

琼脂

14g

最终pH 5.8±0.1

使用方法(计数用法):

1、称取四环素检定培养基24.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min。

2、双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行,并注意避免微生物及抗生素污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化,避免直火加热。

3、双碟的底层:用灭菌大口20mL吸管或其它灭菌分装器,吸取已融化的培养基20mL注入双碟内,待凝固后加入菌层。(双碟内的培养基应均匀的分布于平皿内。)

4、菌层:取出试验用菌悬液,按预试好的加菌量[使0.05单位/mL浓度的四环素标准溶液可产生12mm以上的清晰、完整的抑菌圈],用灭菌吸管吸取菌悬液适量,加入已融化并保温在水浴中(水浴温度50~60℃)的培养基内,摇匀,作为菌层培养基使用。取出加有底层培养基的双碟,用灭菌大口5mL、10mL吸管或其他适宜分装器,吸取菌层培养基6mL,加于底层培养基上,使其均匀摊布,等凝固后放置钢管。

5、放置钢管:使用钢管放置器或小眼科镊子,使钢管平稳的落在培养基上,相应剂量的钢管 对角均匀放置。钢管放妥后,双碟静置5~10分钟后,再开始滴加抗生素溶液。

6、c滴加抗生素溶液用灭菌毛细滴管或微量加样器(调节加样量约为200-300μL),在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加标准品及样品溶液顺序,因实验设计方法不同而异。(2.2)法,在双碟的4个钢管中分别成“Z”字形滴加标准品及样品高、低两种浓度的溶液;在(3.3)法的6个钢管中间隔3个钢管中分别滴加标准品及样品高、中、低3种浓度,并使相同浓度成对角。滴加溶液至钢管口平满。

7、滴加完毕,用陶瓦盖覆盖双碟,平稳置于双碟托盘内,双碟叠放不可超过3层,将双碟托盘水平平稳地移入培养箱中间位置,在或该药品标准规定的温度下培养至所需时间。

8、抑菌圈测量:测量前应检查抑菌圈是否圆整,如有破圈或圈不圆整,应舍弃该碟。可用抑菌圈测量仪或游标卡尺测量。

质量控制:

本品在灭菌后应澄清无沉淀,下列菌株接种后30~32℃培养16~18h生长情况如下表:

菌 名

菌 号

抗生素

检测效果

蜡样芽孢杆菌

CMCC(B_)63301

四环素

抑菌圈清晰圆整,直径与浓度的对数值成显性相关

贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规 格:100g

参考文献:

1.GB/T9695.16-88 中华人民共和国国家标准 肉与肉制品四环素族抗生素残留量检验

2.SN 0179-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中四环素族抗生素残留量检验方法

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