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霍乱弧菌生化鉴定盒(24种×5次/盒)

商品类别:大盒生化鉴定管

货 号 :071830

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规 格 :24种×5次/盒

浏览次数:2814次

添加日期:2014-01-08

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  霍乱弧菌生化鉴定盒(24种×5次)

  (SN/T 1022-2010)

  一)整套试剂及用品

  鉴定生化反应的24种试剂(表1)、5瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、5支一次性吸管。

  二)西林瓶的使用方法

  开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

  三)弧菌科生化鉴定盒的详细使用方法

  霍乱弧菌为革兰氏阴性短小稍弯曲的杆菌,0.5-0.8×1.4-2.6μm,菌体一端有一条鞭毛,运动活泼。生长最适宜温度为35℃~38℃最适pH7.2~7.4,在pH6.0~9.2内可以生长,具有耐碱性。

    挑取TCBS平板分离的可疑菌落进行革兰氏染色镜检,将疑是霍乱弧菌的菌落接种于T1N1琼脂上, 37±1℃培养18-24h,置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。

    注意:如有特殊的接种方式、培养温度、时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

霍乱弧菌生化鉴定盒

表一

 

产品名称

结果判定

培养温度、时间(小时)

使用说明

阳性

阴性

3%NaCl三糖铁琼脂(TSI)

 

产酸变黄色

产硫化氢变黑色

不变色

353718-24h

用接种针挑取新鲜菌苔穿刺,穿刺完毕后在斜面上划字形接种,西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)后竖立培育。

无盐胨水、2NaCl胨水、6NaCl胨水、8NaCl胨水、10NaCl胨水

生长

不生长

3537

24h

 

 

3NaCl蛋白胨水

红色

不变色

3537

24h

西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)培养后加靛基质试剂23滴,立即观察结果。

1%NaCl 蔗糖、1%NaCl 乳糖1%NaCl葡萄糖产气、1%NaCl 阿拉伯糖、1%NaCl 甘露糖、1%NaCl 纤维二糖

黄色

紫色

3537

824h

 

β-半乳糖苷(ONPG

深黄色

淡黄色或无色

3537

1224h

 

续上表

产品名称

结果判定

培养时间

(小时)

使用说明

阳性

阴性

氧化酶试剂

蓝紫色

不变色

30秒内

滴加1滴试剂到一小块洁净滤纸上,以刚刚浸湿为宜;用玻棒或接种环(铂或塑料)挑取适量新鲜菌苔涂在纸片上。

1%NaCl赖氨酸脱羧酶、1%NaCl鸟氨酸脱羧酶

试验管绿色或黄绿色,对照管变黄

试验管与对照管均变黄

3537

1824h

每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支,并加灭菌液体石蜡34滴覆盖培养基表面。培养1824小时,未见阳性结果,继续培养4天,再做最终结果判定。

1%NaCl精氨酸双水解酶

试验管蓝绿色,

对照管变黄

试验管与对照

管均变黄色

3537

24—48h

1%胰蛋白胨大豆琼脂斜面(42生长)

生长

不生长

4224h

划线接种至斜面。

  

4液态

4固态

3537

48—72h

挑取新鲜菌苔穿刺接种,西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)后竖立培育,培养后置4冰箱30分钟后观察结果。如果24h不液化,则继续培养到48h再观察。

尿素

桃红色

淡橙红色

3537

1224h

打开西林瓶胶塞后,向西林瓶中加入所配备的1.5mL/瓶的无菌水,充分溶解。再用接种针挑取新鲜菌苔直接接种于西林瓶内。接种后,置于35-37培养箱中培养12-24h,观察结果。

 

备注:本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。

 

  四)霍乱弧菌生化鉴定特征见表2

  表2 霍乱弧菌生化鉴定特征(均含1%NaCl)

生化项目

生化性状

生化项目

生化性状

TCBS

Y

D-甘露糖

TSI

A/A

葡萄糖产气

0%氯化钠

氧化酶

2%氯化钠

ONPG

6%氯化钠

精氨酸双水解酶

8%氯化钠

赖氨酸脱羧酶

10%氯化钠

鸟氨酸脱羧酶

靛基质

抑菌试验

 

42℃生长

10ug O/129

S

蔗糖

150ug O/129

S

D-纤维二糖

明胶酶

乳糖

尿素酶

阿拉伯糖

 

 

注:Y-黄色;K-碱性;A-微酸性;+80%或更多的菌株阳性;―80%或更多的菌株阴性; S-敏感。所有测试均不产硫化氢或者气体。

 

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