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微生物检测与质控菌种

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粘质沙雷伯氏菌 CMCC(B)41002

商品类别:微生物检测与质控菌种

货 号 :FSCC217001

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规 格 :支

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添加日期:2014-01-13

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  微生物检测冻干质控菌种粘质沙雷伯氏菌 CMCC(B)41002使用说明书

  1 复苏菌种粘质沙雷伯氏菌 CMCC(B)41002前应准备适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。

  2 启开菌种前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开塑盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞,加入0.3mL左右的配套液体培养基,用无菌滴管反复吹吸,将冻干菌种溶解成为悬液,然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基,并连同剩余菌悬液的西林瓶一起放置于36℃培养箱中进行培养。(菌种与培养和保存方法对应表见附表1,培养基、培养方法和传代保存方法见附表2)。

  3 次日观察菌种粘质沙雷伯氏菌 CMCC(B)41002的生长情况,如未生长,应继续培养24h,或吸取培养之后的菌悬液中再次接种培养基,培养24h观察。

  4 菌株为一次性使用品,开启之后不能反复使用或保存,暂不开启的菌种应在4℃保藏。

  5 复苏后的菌种在传1-2代后使用,建议菌种使用5代后弃用。

  注):购买后请尽量及时使用冻干菌种,如发现菌种不活或污染等情况,请在购买之日起1个月内与我们联系。

  冻干菌种复苏示意图:冻干菌株复苏图

  附表1 菌种与培养和保存方法对应表冻干菌株复苏方法

  附表2 培养基、培养条件和保存方法

  方法1:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上35-37℃划线培养24-48h。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法2:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上划线35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法3:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)后涂布,35-37℃培养24-48h。平板(第一代)放于4℃冰箱保存,并用封口膜或其它封条密封平板,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法4:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法5:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于疱肉牛肉粒肉汤(027140)加液体石蜡1cm,35-37℃培养48-72h。肉汤(第一代)放于4℃冰箱环境下保存,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法6:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入碱性蛋白胨水,充分悬浮后取适量的菌悬液于碱性琼脂(025040)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法7:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入3%NaCl碱性蛋白胨水,充分悬浮后放置于36℃下复苏8-12小时。取适量的菌悬液于3%NaCl营养琼脂(营养琼脂(022020)加入2.5gNaCl/100mL)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法8:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入沙氏液体培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050)斜面25-28℃培养2-5天。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每两个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法9:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入布氏肉汤,充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)42±1℃微需氧条件下培养48-72h。平板(第一代)放于4℃冰箱微需氧环境下保存,并用封口膜或其它封条密封平板,每个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法10:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入TPY肉汤,充分悬浮后取适量的菌悬液于BBL琼脂(027330)斜面厌氧环境下35-37℃培养48h-72h。斜面(第一代)放于4℃冰箱厌氧环境下保存,每个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。

  方法11:

  无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干粉中加入脱脂奶粉溶液,充分悬浮后取适量的菌悬液于脱脂奶粉溶液(10%)35-37℃培养48h-72h。 菌种(第一代)放于4℃冰箱保存,每两个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应消毁。

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