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甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP

英文名称:Mannitol Yolk Polymyxin Agar Base

货 号 :028380

规 格 :250g

用途:甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP

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添加日期:2014-02-26

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  028380 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP)

  (Mannitol Yolk Polymyxin Agar Base)

  用 途:

  用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和SN/T2206.2-2009,ISO标准)。

  原 理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂;卵黄含有卵磷脂,蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶,在菌落周围产生沉淀环;并发酵D—甘露醇产酸使菌落显黄色;多粘菌素B可抑制杂菌的生长。

  配方(每升):

  蛋白胨 10g

  牛肉膏粉 1g

  D—甘露醇 10g

  氯化钠 10g

  琼脂 15g

  酚红 0.025g

  最终pH7.4±0.2

  使用方法: (平板计数法)

  1、称取本品46g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,每瓶100mL,121℃灭菌15分钟。

  2、用时加热溶化琼脂,冷至50℃后,每100mL培养基基础中加入配套试剂1支 (SR0170)( 多粘菌素B10000IU) 和50%卵黄液5mL,混匀后倾注灭菌培养皿。

  3、样品的制备。

  以无菌操作将检样25g(mL)用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1—10-5的稀释液。

  4、取各稀释液0.1mL接种到MYP琼脂平板上,用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。每稀释度接种两个MYP琼脂平板。

  5、将平板置于36±1℃培养12—20h。

  6、选取适当菌落的平板进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。

  蜡样芽孢杆菌在MYP平板上生成的菌落为粉红色,环绕产生卵磷脂酶沉淀环。如反应不典型,可继续培养24h再计数。

  7、计数后从每个平板上选取5个已计数的菌落,按有关操作进行证实实验。

  8、根据证实实验确定为蜡样芽孢杆菌的菌落数,按比例计算出该皿内的蜡样芽孢杆菌菌落数,然后乘其稀释倍数,即得每克(或mL)样品所含蜡样芽孢杆菌数。例如MYP平板的可疑菌落为25个,取5个鉴定,证实为4个,乘上稀释倍数(如10-4),再乘上1 g(或mL)检样数(取的是0.1mL样)则为:

  25×4/5×10-4×10=2×106

  附:50%卵黄液: 取鲜鸡蛋,用硬刷将蛋壳彻底洗净,沥干,放于70%酒精溶液中浸泡1h,以无菌操作取出卵黄,加入等量灭菌生理盐水,混匀后备用。

  质量控制:

  质控菌株接种后于36±1℃培养24h,结果如下。

  贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

  规 格:250g

  参考文献:

  1. GB/T 4789.14-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 蜡样芽孢杆菌

  2. GB/T 4789.28-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法,培养基和试剂

  3. SN 0176-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法

  4. SN/T2206.2-2009 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 化妆品微生物检验方法 第2部分:需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌

  5.ISO7932:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃