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营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基

英文名称:

货 号 :022020P1

规 格 :250g

用途:营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基

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添加日期:2014-08-08

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产品中文名:营养琼脂培养基(NA)瓶装颗粒

Product Name:Nutrient Agar

【产品用途】

营养琼脂培养基(NA)瓶装颗粒用于细菌总数测定、纯培养及保存菌种,也可用于消毒效果测定。

【检验原理】

蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

【配方成分】

配方(每升)  含量

蛋白胨        10g

牛肉膏粉      3g

氯化钠         5g

琼脂          15g

最终pH         7.3±0.2

【使用方法】

1、称取本品33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。依次做1:100,1:1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法:

做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

7、菌落计数的报告:

选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计

A:稀释度的选择:

应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见附表)。

若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字(见表中例2及3)。

若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。

若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。

若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。

菌落数的报告:

菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。

【质量控制】

1. 外观方面

淡黄色颗粒,高压灭菌后呈淡黄色透明无沉淀,倾注平皿冷却后呈淡黄色凝胶。

2. 生物学方面

下列质控菌株接种待测试培养基,36℃±1℃培养18~24h,结果如下:

营养琼脂培养基

【储存条件及保质期】

贮存于避光、阴凉干燥处;贮存期三年。

【注意事项】

1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

2、自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。

3、质检报告可以登录环凯网站http://www.huankai.com,打开“客服中心”页面,输入产品批号下载。

【废物处理】

检测之后带菌平板置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。

【执行标准】

Q/HKSJ 03 普通微生物培养基