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革兰氏染色液

英文名称:Gram Stain

货 号 :029010

规 格 :10mL×4种/盒

用途:用于细菌革兰氏染色。

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添加日期:2014-04-09

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革兰氏染色液

【产品用途】

革兰氏染色液用于细菌革兰氏染色实验。

【检验原理】

通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此,能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

【配方成分】

1、结晶紫染色液

配方(每瓶)        含量 

结晶紫                 0. 1g 

95%乙醇              2mL 

1%草酸铵水溶液  8mL

2、革兰氏碘液

配方(每瓶)     含量 

碘                   0.033g 

碘化钾            0.067g 

蒸馏水              10mL

3、脱水酒精

配方(每瓶)    含量 

95%乙醇          10mL

4、沙黄复染液

配方(每瓶)    含量 

沙黄              0.025g 

95%乙醇          1mL 

蒸馏水             9mL

【使用方法】

1、将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液。染1min,水洗。

2、用空瓶装所需的革兰氏碘液,临用时滴加革兰氏碘液,作用1min。水洗。。用剩碘液应及时再装回棕色玻璃瓶中。

3、滴加脱色酒精,约30s;或将脱色酒精滴满整个涂片,立即倾去,再用95%酒精滴满整个涂片,脱色10s。

4、水洗,滴加沙黄复染液,复染1min,水洗,待干,镜检。

5、结果:革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

【质量控制】

指标

质控菌株及编号

特征性反应

特征观察

大肠埃希氏菌  ATCC25922  

革兰氏阴性,镜下呈红色,短杆状

金黄色葡萄球菌 ATCC6538

革兰氏阳性,镜下呈紫色,球状