产品名称：Cas12a Nuclease(2.5μg/μl)
中文名称：Cas12a 核酸酶
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE373-YH01-01A | Cas12a Nuclease(2.5μg/μl) | 50μg/盒(2.5μg/μl) | crispr基因编辑（核酸酶） | 1365 |
产品描述：
CRISPR/Cas 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一 种适应性免疫防御系统。CRISPR 相关蛋白 Cas9 已经广泛应用 于基因组编辑，相比于 Cas9 蛋白，Cas12a 具有类似的基因组编 辑效率，但具有较低的脱靶效率，在基因治疗应用中具有巨大 的 潜力。
不同于 Cas9 蛋白，Cas12a 不需要 tracrRNA，只需要单个由 41-44nt 核苷酸组成的 crRNA 引导。这非常有利于基因组编辑，因 为 Cas12a 不仅比 Cas9 小，而且还具有较小的 crRNA 分子（接 近 Cas9 的总 sgRNA 的一半）。与 Cas9 需要富含 G 的 PAM 相 反， Cas12a-crRNA 复合物通过识别富含 T（5'-TTTN-3'）的 PAM 基 序来切割靶 DNA。Cas12a 执行剪切后的 DNA 双链断裂 引入了 4 或 5 个核苷酸突出的粘性末端。这促使 Cas12a 可以作 为一种新 型的基因检测和成像的工具。
本制品在蛋白两端分别加了核定位信号（NLS），当 Cas12a 以 NLS 序列表达时，Cas12a-RNP 复合体可以在进入细胞后立即 定位到细胞核。无需体内转录或翻译，提高了该方法在质粒系 统上的效率。
产品特点：
1) 纯蛋白体系，避免 CRISPR 基因敲除时引入质粒或病毒干扰；
2) 可显著降低脱靶效应。
产品用途：
1，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲除；
2，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶点 DNA 效率检测，降低体内筛选成本；
4，体外剪切靶 DNA 的特异位点。
应用实例：图例）Cas12a Nuclease 做 DNA 片段体外切割活性检测：
带有靶位点的 DNA 片段约为 2000bp，酶切后的片段为 1600bp 和 400bp。
保存温度：-20℃保存，或-80℃长期保存。
Cas12a Nuclease(2.5μg/μl) 产品包装（A包装）：
| 产品组成 | 体积 |
| Cas12a Nuclease (2.5μg/μl) | 20 μL |
| 10× Cas12a Reaction Buffer | 1ml |
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的 目的条带，纯度达 95%；内毒素含量< 100EU/mg；qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留；无 RNase、核酸内、外 切酶污染。
体外切割体系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| Cas12a Nuclease | 0.5-1.5 μg |
| 10× Cas12a Reaction Buffer | 2 μl |
| RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注：在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止 dsDNA 不 纯 导致 sgRNA 的降解。
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* 为 Cas9(D10A) Nickase，能在与 sgRNA 靶序列互补的 DNA 链上 产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可减少意外的脱靶基因修饰。
** 为 Cas9(H840A) Nickase，能在 sgRNA 靶序列所在的 DNA 链上 产 生切口，从而形成功能性的单链断裂，可减少意外的脱靶基因修饰。
***为 Cas9 D10A,H840A 双突变失活酶，具有靶 DNA 结合活性，但 无 切割活性，可用于阴性对照等用途。
