无菌检查用硫乙醇酸盐流体培养基配制常见问题及解决方法
发布时间：2023-09-22 浏览次数：541
硫乙醇酸盐流体培养基（简称FT）可用于需氧菌、兼性需氧、厌氧菌的培养，是药品生物制品及器械无菌检查的常用培养基之一。
FT的特点：该培养基配方特性比较特殊，含少量琼脂，配制成溶液后呈流体状，降低液体内对流，防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散，且含有还原性的胱氨酸、硫乙醇酸钠和氧气指示剂刃天青，有利于溶液内部形成厌氧环境，且通过氧气指示剂颜色变化区分厌氧层和氧化层。在进行厌氧菌培养时，不需借助厌氧罐、厌氧培养箱等设备，也不需覆盖无菌液体石蜡。
FT配制使用中的常见问题及解决方法：
1、灭菌后澄清透明，但放置或培养一段时间后培养基内常出现一些絮状物，难以与生长的微生物相区别？
原因分析：因FT配方含少量琼脂，如在配制时没有充分加热将少量琼脂煮溶，且加热和分装时没有充分搅拌将溶解的琼脂均匀分布于溶液中，那么分装灭菌冷却后溶液中琼脂量相对稍多的培养基内部琼脂会凝固成团，因此就会出现白色絮状悬浮物。此外，也有可能与使用的琼脂粉本身的澄清度、溶解度和凝固特性有关，如琼脂本身粘度高，难分散均匀，或者琼脂容易聚集凝固，也容易出现絮状悬浮物。
解决方法：
1）将琼脂充分煮溶并搅拌使其均匀分布【1】。配制时将培养基粉末或颗粒溶于纯化水中边加热边搅拌均匀，需加热至完全溶解，建议搅拌煮至沸腾并维持2~3分钟，再边搅拌边分装，分装后采用经验证的灭菌程序灭菌。
2）选择使用高透型琼脂作为原料的FT培养基【2】。如，我司货号028034/028034P1的硫乙醇酸盐流体培养基(高透明度) 产品及其对应即用型成品。
2、培养基灭菌后只存放一天就变青蓝色或浅粉红色？
原因分析：该培养基含刃天青氧气指示剂，氧气充足显红色，完全厌氧显无色，从有氧过渡到无氧或者从无氧过渡到有氧时呈青蓝。因此，灭菌后存放一天就整瓶或整管变色，一方面跟培养基本身的氧化还原能力有关，另一方面跟分装容器内氧气量有关。如培养基开封后没有密封好，存放期间空气中的氧气持续氧化培养基中的还原性成分，导致该培养基还原性能下降，因此配制灭菌后培养基短时间内容易全被氧化使氧气指示剂变色。也可能是分装容器体积比分装培养基量大很多，容器内空气层大，且非密闭容器，培养基量少还原能力差容易被氧气氧化所致。
解决方法：
1）干粉或颗粒培养基开封后需立即旋紧瓶盖，减缓培养基被空气氧化速度，保证其质量。
2) 灭菌前分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应不小于2/3,如非压盖瓶分装，灭菌后从灭菌锅拿出来需趁热旋紧瓶盖或管盖，以减少瓶内氧气量。
3）选择即用型成品培养基。这类产品在生产过程中采用先进技术驱氧，可以很好解决培养基氧化层的问题。如：高透明硫乙醇酸盐流体培养基即用型产品系列。
参考文献
【1】李嘉琪，唐明清.清除硫乙醇酸盐培养基内絮状沉淀物方法的实验. 辽宁药物与临床;1999年8月第2卷第3期.
【2】李泽康，卢勉飞，蔡芷荷，陈博，吴清平，万强. 硫乙醇酸盐流体培养基（FT）改进效果的测试. 当代医学 2018年5月第24卷第14期总第493期.
【3】代淑艳，王殿钧，解华，宋伟平，贾滨，姜远航，张洪超.硫乙醇酸盐培养基中的刃天青的作用分析.中国生物制品学杂志O05年9月第18卷第5期.
