带你了解大肠菌群复发酵培养基BGLB的前世今生！
发布时间：2023-10-25 浏览次数：1933
列位看官，你可知晓，市售的大肠菌群复发酵培养基BGLB，是有两种配方滴。其一名唤煌绿乳糖胆盐肉汤，其二称着亮绿乳糖胆盐培养液。
细细比对两个配方，煌绿和亮绿其实是同一味药的不同名称，英文都曰Brilliant Green。这味药在两种处方中的剂量也不同，“煌绿”是0.0133 g，”亮绿”为0.0113 g，属于同质不同量。另外，这俩处方还有个区别，一个添的是20 g牛胆粉，另一个加的是2 g牛胆盐。可这到底是咋滴回事么？
这个问题按下不表，咱们先来扒一扒BGLB的罗曼史。
BGLB，洋人通常唤作Brilliant Green Bile Broth 2%（BGB）。 1936年，美国公共卫生协会(APHA)发布的《水和废水检验的标准方法》中，将它用作大肠菌群的确认培养基。当时发现，把一些增菌后大量产气的麦康凯肉汤接种到麦康凯琼脂，用以确认大肠菌群时，却木有菌落形成。原来在麦康凯肉汤中产气的那厮，不是别人，正是产气荚膜梭菌！需要在厌氧条件下才能生长。各位看官，您遇到这种情况吗：把产气的LST接种到VRBA上，却没有细菌生长？
为了省略实验中繁琐的分离和鉴定操作，微生物学家开始使用BGLB，来确认大肠菌群。后来发觉，这BGLB的选择性和特异性甚好，初发酵产气后无需进行细菌分离和生化实验，直接将初发酵的培养基转种到BGLB中，煌绿和大量胆酸抑制了产气荚膜梭菌和芽孢杆菌，确认大肠菌群起来既省时又省力。也是这偏方有着不错的疗效，后来在乳品和食品的大肠菌群检验中，也逐渐流传开来。
80多年弹指一挥间，BGLB的配方一直未变。经过比较发现，那煌绿乳糖胆盐肉汤与BGLB的传统配方相同，而亮绿乳糖胆盐培养液与BGLB的传统配方不一致。咋地会有这种情况出现呢？
据说这亮绿乳糖胆盐培养液，是用于测定天然矿泉水中大肠菌群的。咱们就再来聊一聊检验标准，GB8538 的前世今生吧。
GB 8538于1987年首次制定，1995年、2008年和2016年先后经过了三次修订。考据GB 8538历年的版次发觉，这亮绿乳糖胆盐培养液的方子，大约遗传自1988年实施的GB 8538.62-1987。
在原始的配方中，亮绿的剂量是0.0133 g。可叹的是，2009年实施GB 8538-2008，却将亮绿的剂量抄成了0.0113 g。现行的标准GB 8538-2016，也是照抄照搬，亮绿剂量的错误因此延续至今。
如此这般，亮绿乳糖胆盐培养液配方中的那2 g牛胆盐，与BGLB传统配方中的20 g牛胆粉，又作何解？
咱们还是再温习一下微生物基础知识吧。所谓牛胆盐，是把牛胆汁用水解、脱脂、酸化等工艺制成的粉粉；而牛胆粉，却是将那新鲜牛胆汁直接脱水干燥而成。在牛胆盐中有效抑菌成分胆酸的含量，一般是80%左右，而牛胆粉中胆酸的含量约为40%，仅是牛胆盐的一半。
所以呢，要达到同样药效，牛胆盐的剂量应该是10 g，而不是2 g。因此，亮绿乳糖胆盐培养液的方子从开始就错了，这一错就是三十年！自2009年开始，这方子更是错上加错！
这些错误的方子，流传甚广，遗害尤深。不仅误导了微生物检验猿，更是消遣了培养基生产商。厂家明知错误也不敢改正，怕的是配方不符合标准引发用户退货。
人生本来，苦恼已多，犯个小错又如何？可是我的天，长达三十年的错误啊，这让无辜的检验猿情何以堪！
有道是：情中情因情感妹妹，错里错以错劝哥哥。此时此刻，微生物检验猿的心情，正与那多愁善感的林妹妹一般，虽然有万句言词，只是不能说得，半日，方抽抽噎噎的说道：“你从此可都改了罢！”
主要参考文献：
1.APHA (1936). Standard Methods for the Examination of Water and Sewage, 8th New York: American Public Health Association.
2. Mackenzie E. F. W., Windle Taylor E. and Gilbert W. E. (1948) . Recent Experiences in the Rapid Identification of Bacterium coli Type I ,J. Gen. Microbiol. 2. 197-204.
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