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培养细胞的生长方式及类型

发布时间:2023-12-14    浏览次数:327

体外培养的细胞,按其生长方式可分为贴附型和悬浮型两大类。

1.1 贴附生长型细胞

为附着于底物(支持物)表面生长的细胞,本书主要讨论本型细胞的培养。活体体内的细胞除血细胞外,当离体培养时大多数以贴附型方式生长。必须贴附于底物才能生长的细胞称为贴附(锚着)依赖性细胞。

目前已有很多种细胞能在体外培养生长,包括正常细胞和肿瘤细胞。例如:成纤维细胞、骨骼组织(骨及软骨)、心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺、皮肤等组织来源细胞、神经胶质细胞、内分泌细胞、黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。这些细胞在活体体内时,各自具有其特殊的形态;但在体外培养状态下,其贴附生长型细胞在形态上表现得比较单一化,失去其在体内原有的某些特征。一般可将贴附生长的体外培养细胞从形态上大体分为上皮细胞型和成纤维细胞型两类,还有一些难以确定其稳定形态的细胞。

1)、上皮细胞型(图1-1A):细胞培养中的上皮细胞指那些形态上类似上皮细胞,其来源于外胚层及内胚层的细胞,如皮肤及其衍生物、乳腺、肝、肺泡、消化道上皮等组织的细胞,上皮性肿瘤(如鳞状细胞癌)等的培养细胞的形态均呈上皮样。培养中的上皮细胞形态为扁平的多角形,胞质近中央处有圆形的细胞核。其生长特点为细胞之间紧密相靠、互相接,呈“铺路石”状,具有连接成片的能力。

2)、成纤维细胞型(图1-1B、C):起源于中胚层组织的细胞,如:纤维结缔组织、平滑肌、心肌、血管内皮等。本型细胞的形态似在体内生长的成纤维细胞,具有长短不等的数个细胞突起,因而多呈梭形、不规则三角形或扇形,核为卵圆形位于靠近胞质的中央。其生长特点为细胞一般并不紧靠相连成片,而是排列为漩涡状、放射状,或栅栏状。

上述两种以形态分类的名称,仅是一种笼统的提法,并不是很确切。体外培养时所谓的上皮细胞型细胞或成纤维细胞型细胞,仅是因为其形态与体内的上皮细胞或成纤维细胞类似,并不能将体外培养的这些细胞与体内同名的细胞完全等同;而且,这种名词系用于描述细胞的外形而并非说明细胞的起源。与这两种形态类似的细胞,可能来自不同性质的细胞亚类。取自不同组织的上皮细胞,其生化特征及其原来的形态可有差异;而来自不同组织的形态相似的成纤维细胞,其发展的趋向可能并不相同。例如:在体外培养中,可从脾脏及骨髓各自分离出形态相似的“成纤维细胞”,但是当接种这些细胞于同源的动物时,只有那些来自骨髓的“成纤维细胞”才有可能形成骨样组织。因此,采用上皮样细胞或成纤维细胞样细胞的名词似乎更为恰当。此外,体外培养细胞的形态并不完全是恒定的,可因各种因素而发生改变,包括pH、细胞密度、污染等的影响。例如:Hela细胞本身是上皮细胞型,但若培养的条件过酸或过碱,则可呈现为梭形而似成纤维细胞样;有些细胞在高浓度血清中生长时为细长的成纤维细胞样,在低浓度血清中则更似上皮样。

1.2 悬浮生长型细胞

少数细胞类型在体外培养时不需要附着于底物,在悬浮状态下即可生长,包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞,尤其是血液白细胞,以及癌细胞。这些细胞在悬浮中生长良好,可以是单个细胞或为微小的细胞团,观察时细胞呈圆形。由于悬浮生长于培养液之中,因此其生存空间大,具有能够提供繁殖大量细胞、传代繁殖方便(只需稀释而不需消化处理)、易于收获细胞等优点,并且适于进行血液病的研究。缺点是不如贴附生长型观察方便,而且并非所有的培养细胞都能悬浮生长。

来源:《细胞培养 第3版 - 刘斌;司徒镇强》电子书 第一章第5节
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