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副溶血性弧菌细菌生化鉴定盒(SN标准)

英文名称:

货 号 :071771

规 格 :18种×5次/盒

用途:常规鉴定溶血性弧菌15项生化反应(参考“中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN/T0173-201

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  副溶血性弧菌细菌生化鉴定盒(18种×5次)(SN/T 0173-2010)

  一)整套试剂及用品

  鉴定生化反应的24种试剂(表1)、5瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、5支一次性吸管。

  二)西林瓶的使用方法

  开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

  三)副溶血性弧菌生化鉴定盒的详细使用方法

  注意:如有特殊的接种方式、培养时间、温度或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

    副溶血性弧菌为革兰氏阴性无芽胞杆菌,易呈多形态,有棒状、弧状、卵圆状、球状、丝状等,排列不规则,一般大小为0.3~0.7µm×1~2µm,单端一根鞭毛,有动力,运动活泼,两端浓染,在固体培养条件下能生长周鞭毛。菌落常为隆起,圆形,稍浑浊不透明,表面光滑,湿润,不产生色素。

    挑取平板分离的可疑菌落划线接种3%NaCl胰蛋白胨大豆琼脂平板35-37℃培养18-24h,革兰氏染色镜检,并将新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。

 

    注意:如有特殊的接种方式、培养时间、温度或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

1

产品名称

结果判定

结果观察

温度、时间(小时)

使用说明

阳性

阴性

氧化酶试剂

蓝紫色

不变色

30 

滴加1滴试剂到一小块洁净滤纸上,以刚刚浸湿为宜;用玻棒或接种环(铂或塑料)挑取适量新鲜菌苔涂在纸片上。

1%NaCl三糖铁琼脂

产气有气泡,

产酸变黄色,

产硫化氢变黑色,

有动力扩散生长

无气泡,

不变色

无扩散生长

353724

用接种针挑取新鲜菌苔穿刺,穿刺完毕后在斜面上划字形接种,竖立培育。西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)后竖立培育。

无盐胨水、3NaCl胨水、6NaCl胨水、8NaCl胨水、10NaCl胨水

生长

不生长

353724

 

3%NaCl蔗糖

黄色

紫色

3537824

 

1%NaCl赖氨酸脱羧酶

1%NaCl鸟氨酸脱羧酶

 

试验管蓝绿色,

对照管变黄

试验管与对照管均变黄

35371824

每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支,并加灭菌液体石蜡34滴覆盖培养基表面。培养1824小时,未见阳性结果,继续培养4天,再做最终结果判定。

1%NaCl精氨酸双水解酶

试验管蓝绿色,

   对照管变黄

试验管与对照

管均变黄色

353724—48

同上,同时接种氨基酸对照管一支,并加灭菌液体石蜡34滴覆盖培养基表面。试验管变蓝绿色,对照管变黄为阳性,两管均为黄色为阴性,作假单胞菌属鉴定时不需覆盖液体石蜡。

β-半乳糖苷(ONPG

深黄色

淡黄色或无色

35371224

 

3%胰蛋白胨大豆琼脂斜面(42生长)

生长

不生长

4224

 

OF( Hugh-leifson)

 

 

353724—48

被检菌同时接种两支生化管,其中一支加灭菌液体石蜡5-8滴覆盖表面。两支管均为黄色判断为发酵型细菌;加石蜡管不变黄,而未加石蜡管变黄为氧化型细菌;两支管均不变黄为产碱型细菌。

V-P 半固体

动力:扩散生长,VP:滴加VP试剂后变红色

动力:无扩散生长,

VP:滴加VP试剂后变红色

353724—48

用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种,竖立培育。

培养后依次加入8VP试剂甲液及4滴乙液,混匀,再培养1020分钟观察结果。

1%NaCl蛋白胨水

红色

不变色

353724—48

西林瓶西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)培养后加靛基质试剂2-3滴,立即观察结果

备注:本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。

 

四)副溶血性弧菌的生化特性见表

2   副溶血性弧菌的生化性状

试验项目

结果

革兰氏染色镜检

阴性,无芽胞,呈棒状、弧状、卵圆状

氧化酶

+

3%NaCl三糖铁琼脂

底层变黄不变黑,不产气,斜面不变色或红色加深,穿刺接种处扩散生长

无盐胨水

-微弱生长

3% NaCl胨水

+

6% NaCl胨水

+

8% NaCl胨水

+

10NaCl胨水

-或微弱生长

3%NaCl蔗糖

+

靛基质

+

3%NaCl赖氨酸脱羧酶

+

3%NaCl赖氨酸脱羧酶

+

3%NaCl精氨酸双水解酶

V-P

动力

+

β-半乳糖苷(ONPG

42生长

+

OF ( Hugh-leifson)

不分解

 

 

//