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蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒

英文名称:

货 号 :071801

规 格 :9种*10支/盒

用途:鉴定蜡样芽孢杆菌常规生化反应10项

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  071800 蜡样芽胞杆菌胞杆菌生生化鉴定盒(8种×10次)

  一)整套试剂及用品

  鉴定生化反应的8种试剂(表1)、8瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶1McFarland的浊度管、8支一次性吸管。

  二)生化管的使用方法

  开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶

  胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

  三)蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒的详细使用方法

  蜡样芽胞杆菌为革兰氏阳性大杆菌,宽度在1µm或1µm以上,芽胞呈卵圆形,不突出菌体,多位于菌体中央或稍偏于一端。

  能产生卵磷脂酶和酪蛋白酶,不发酵甘露醇和木糖。在MYP平板上为粉红色菌落,周围有粉红色的晕;在酪蛋白琼脂上菌落周

  围有透明圈。本菌在肉汤中生长浑浊,常微有菌膜或壁环,振荡易乳化,在普通琼脂平板上生成的菌落不透明、表面粗糙、似

  毛玻璃状或融腊状、边缘不齐。

  将待试品用10倍梯度稀释法稀释至合适的浓度,MYP平板分离,37℃培养12~20小时,将疑似蜡样芽胞杆菌的新鲜菌苔

  置于无菌生理盐水中,以1 McFarland的浊度管为标准对照,制备成1McFarland (约3.0×108cfu/mL )菌悬液,往每种微量生化

  管内滴加2滴(约0.06mL)菌悬液。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表

  注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,

  结果观察见表1。

   注意:如有特殊的接种方式或培养时间,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

  四)蜡样芽胞杆菌的生化分型和鉴定特征 (只供参考)

  1. 蜡样芽胞杆菌可根据对柠檬酸盐利用、硝酸盐还原、淀粉水解、V-P反应、明胶液化性状的试验,将该菌分成不同的型别。

  本菌在生化性状上与苏云金芽胞杆菌极为相似,但后者可藉细胞内产生蛋白质毒素结晶体加以鉴别。其方法如下:取经30±1℃培养24±2h并于室温放置3~4天的营养琼脂(022022),适用于芽胞杆菌蛋白质毒素结晶体的形成)培养物少许于载玻片上,滴加蒸馏水混匀并涂成菌膜。经自然干燥,微火固定后,加甲醇作用30秒后倾掉,再通过火焰干燥,于载玻片上滴满0.5%碱性复红液,放火焰上加热微见蒸气(勿使染液沸腾)后持续1.5分钟,移去火焰,更换染色液再次加温染色30秒,倾去染液用自来水彻底清洗、晾干后油镜镜检。观察有无游离芽胞和染成深红色的菱形、正方形或其它性状的蛋白质毒素结晶体(如发现游离芽胞形成的不丰富,应将培养物置室温2~3天再行检查),如有即为苏云金芽胞杆菌,蜡样芽胞杆菌检查为阴性。