English

2×Fast Pfu Master Mix(货号:HKE035-01B | 规格:1ml× 5)

英文名称:2×Fast Pfu Master Mix

货 号 :HKE035-01B

规 格 :1ml× 5

用途:用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应

浏览次数:125次

购买数量:
-
+
联系方式:
商品详细
说明书
微生物图册
行业应用
相关论文

产品名称:2×Fast Pfu Master Mix
中文名称:2倍快速Pfu酶预混液

产品编号与包装规格:

编号产品名称规格产品介绍产品价格
HKE035-01B2×Fast Pfu Master Mix1ml× 52倍快速Pfu酶预混液 

产品描述:本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu Master Mix专为扩增克隆DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3×10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu酶,2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高灵敏度、抗干扰强等特点,能获得更理想的扩增结果, 并大幅度缩短扩增反应时间,非常适用于1-20kb长片段的扩增。

产品特点:
      高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的50倍。
      灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
      快速高效:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30 秒可延伸1kb以上,可在较短时间内获得高产量的PCR产物(图例一)。
      快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。

产品用途:用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。

使用建议:(Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3´端"A" 突出,除使用环凯PCR一步定向克隆试剂盒(Cat. No: HKNR001) 外,其它PCR产物的克隆方案有:)
      1)PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
      2)将产物3´末端加A后再与T载体连接。
      3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度, 理想的引物长度为20-30mers。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。

应用实例:图例一)50μL 扩增体系中,λDNA 为模板, 扩增 1kb~20kb 片段。

50μL 扩增体系中,λDNA 为模板,扩增 1kb~20kb 片段。

泳道 M:λ/Hind III DNAMarker; 
泳道 1:1kb;
泳道 2:2kb;
泳 道 3:4kb; 
泳 道 4:6kb; 
泳道 5:8kb;
泳道 6:10kb; 
泳道 7:12kb;
泳道 8:20kb。

保存温度:-20℃。

产品包装(A 包装):

产品包装(A 包装)

质量保证:经检测无外源核酸酶残留;qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留;能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

常用反应体系(50μL):

常用反应体系(50μL)

常用PCR 循环:

常用PCR 循环

注意事项:
      1)需溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
      2)对高GC含量模板,建议将变性温度提高到98℃。
      3)对于高GC模板,建议配套使用PCR万能增强剂 I(Cat.No: HKE055)或者添加终浓度为5%-8% DMSO。