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NGS mRNA Magnetic Isolation Kit(NGS mRNA 磁珠分离试剂盒)

英文名称:NGS mRNA Magnetic Isolation Kit

货 号 :HKE242

规 格 :12次(48次)

用途:可应用于 RNA-Seq、 cDNA合成及体外翻译等…

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产品名称:NGS mRNA Magnetic Isolation Kit

产品编号与包装规格:

编号产品名称规格产品介绍价格
HKE242ANGS mRNA Magnetic Isolation Kit12次NGS mRNA 磁珠分离试剂盒330
HKE242B48次1169

产品概述:NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 是从总 RNA 中提取 mRNA 的试剂盒,该技术基于 Oligo-dT25 与链霉亲和素磁珠偶联,然后将其作为结合 poly(A)-mRNA 的固相支持物来分离 mRNA。该试剂盒可应用于 RNA-Seq、 cDNA合成及体外翻译等。

产品特点:
      1、本试剂盒根据磁珠法提取 mRNA,操作简便,无需离心。
      2、分离出的 mRNA 最后用少量洗脱缓冲液溶解,可直接进行后续实验,无需再经 RNA 沉淀纯化。
      3、本试剂盒可适用于(10ng-5μg)RNA 样本,mRNA 回收产率为总 RNA 含量的 1%-2%。
      4、本试剂盒可在 30 分钟内从总 RNA 中获得完整的 mRNA,省时高效。

保存条件:Oligo-dT25 Mag Beads 4℃保存,除磁珠外其他缓冲液均-20℃保存。

NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 产品组成:

 A 包装(12 次)B 包装(48 次)
Oligo-dT25 Mag Beads200μl800μl
Binding Buffer(2×)3ml12ml
Wash Buffer8ml30ml
Elution Buffer300μl1.2ml
RNase Free Water1ml1ml×2

操作步骤:冰盒、0.2ml 磁力架、0.2ml/1.5ml Nuclease-free 管、65℃水浴锅、PCR仪等实验前准备材料。
   1、将 Oligo-dT25 Mag Beads 从 4℃取出,静置使其温度平衡至室温(约 30 min)。
   2、将磁珠充分混匀,吸取 15μl 到 Nuclease-free PCR 管中,置于磁力架中,室温静置 30s,小心移除上清。
   3、加入 100μl 2×Binding Buffer 洗涤磁珠,轻轻混匀,置于磁力架中,室温静置 1min,小心移除上清。
   4、重复步骤 3。
   5、加入 50μl 2×Binding Buffer 重悬磁珠。
   6、在一个 Nuclease-free PCR 管中,用 RNase free water 将 0.1-5 μg 总 RNA 稀释至 50 μl,65℃温育 5min。
   7、立即将步骤 5 中的悬浮液加入到步骤 6 的 RNA 中,轻轻混匀,室温静置 10min 以上,使其温度降至室温。(此步骤 mRNA 与磁珠结合)
   8、将样品置于磁力架中,室温静置 2 min,小心移除上清。
   9、加入 200μl Wash Buffer,轻轻混匀,将样品重新放回至磁力架中,室温静置 1min,小心移除上清。
   10、重复步骤 9 两次,最后吸除全部上清。
      注:最后需要用 10μl 移液器吸干净残留液体。
   11、加入 21μl Elution Buffer,混匀后将样品放入 PCR 仪中,80℃,2min;待温度降至 25℃后取出,立即置于磁力架中,室温静置 2min,收集 20μl 上清。(此步骤 mRNA 与磁珠分离)
      注:样品可置于冰上继续进行 NGS 文库构建或其他分析应用,也可以置于-80℃保存。

注意事项:
      1) 磁珠需置于 4℃保存。
      2) 磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。
      3) 操作过程严格保证无 RNase 和核酸污染。
      4) 为获得好的纯化效果,提取的总 RNA 完整度应良好,确保 RIN 值在 7.0 及以上。