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GB4789.28-2024参比培养基质控解析及图谱——TSA篇

发布时间:2024-05-15    浏览次数:451

随着2024年年初GB4789.28-2024重磅发布,随之各地掀起了标准学习的热潮,参比培养基质控标准的加入,也成为了此标准的一大亮点,作为在此标准中起着绝对“标杆”作用的参比培养基,其质控方法、质控要求也受到业内同仁的一致追捧,今天小编就跟大家一起来聊一聊参比培养基的质控。文章附有培养基质控菌高清无码图片奥,一定要看到底!

参比培养基是为保证食品微生物检验用培养基的质量而存在的,凡琼脂培养基,无论是非选择性的还是选择性的,其涉及生长率的测试均需用到参比培养基。参比培养基作为回收率计算的“分母”,其质量优劣对培养基的验收工作至关重要。今天就胰蛋白胨大豆琼脂培养基(Trypticase Say Agar,TSA)参比培养基的质控进行解析,一起来看看吧。

第一,需核对参比培养基标准配方,如图所示;

第二,参比培养基需由具备相应检验能力,并取得通过国家认证认可资质检验机构出具的检测报告。

第三,应满足相关理化指标要求:外观要求为淡黄色粉末,灭菌后为淡黄色透明胶体。PH值控制在灭菌后冷却至25℃时7.3±0.2的范围内。

第四,微生物指标,标准中规定的TSA参比培养基测试菌株为10株,对于参比培养基的微生物促生长检测项目,GB4789.28中规定的质控评定标准中的要求如下:

如何操作呢?

GB4789.28-2024中原文“参比培养基具体检验方法可参考6.1或6.2.3”,那么6.1和6.2.3分别是什么呢?章节6.1为非选择性分离和计数固体培养基目标菌生长率定量测试方法对非选择性的参比培养基TSA具有操作上的指导意义!章节6.2.3为“非目标菌(特异性)定性测试方法”,而TSA/SDA/MRS中测试菌种均涉及其促生长能力,为相应培养基的目标菌,在此6.2.3测试方法不适用于参比培养基的测试方法。

测试方法具体操作如下:

1、工作菌悬液的制备:将标准储备菌株、储备菌株或工作菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他方法,制备10倍系列稀释的菌悬液。进行生长率测试时,细菌和酵母菌每平板的接种水平为50CFU~250CFU,霉菌每平板的接种水平为30CFU~150CFU。

2、接种:选择适宜稀释度的工作菌悬液0.1mL,均匀涂布接种于待测平板和参比平板。每一稀释度接种两个平板。也可使用螺旋涂布法或倾注法进行接种,并按标准规定的条件培养。
【倾注法,菌落长在琼脂内部和表面,其形态不便统一。这里不使用倾注法,而选用螺旋法,也可使用涂布法。个人觉得,倾注法的最佳使用范畴,可以在验收平板计数法用的培养基时考虑使用此法验收,而当培养基做为划线分离或者涂布使用时,优先考虑涂布或螺旋法验收培养基。】

为了直观了解到其测试菌株在TSA参比培养基上的具体菌落形态,小编现将试验菌落特征图列于下表:

菌株名称及编号 培养条件 接种量/cfu 菌落特征图 实验结果
莫氏克罗诺杆菌CMCC(B)4540725℃,48h117莫氏克罗诺杆菌CMCC(B)45407 生长良好,菌落黄色,圆形,表面光滑,湿润。
大肠埃希氏菌CMCC(B)4410236℃,24h99大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 生长良好,菌落灰白色,圆形,表面光滑,湿润
金黄色葡萄球菌CMCC(B)2600336℃,24h54金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 生长良好,菌落淡黄色,圆形
枯草芽孢杆菌CMCC(B)6350136℃,24h71枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501 生长良好,菌落灰白色,圆形,干燥
白色念珠菌CMCC(B)9800128℃,72h206白色念珠菌CMCC(B)98001 生长良好,菌落白色,圆形,表面光滑,湿润
黑曲霉CMCC(F)9800328℃,72h39黑曲霉CMCC(F)98003 生长良好,产黑色孢子
粪肠球菌CMCC(B)3248036℃,24h159粪肠球菌CMCC(B)32480 生长良好,菌落白色,圆形
藤黄微球菌CMCC(B)2800136℃,48h119藤黄微球菌CMCC(B)28001 生长良好,菌落浅黄色,圆形
嗜热嗜脂肪地芽孢杆菌CMCC(B)6350956℃,24h71嗜热嗜脂肪地芽孢杆菌CMCC(B)63509 灰白色,圆形,表面光滑,湿润