071821 单核增生性李斯特氏菌生化鉴定盒(13种×10次)(SN标准)
一)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞
(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
二)单核增生李斯特氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
挑取选择性培养基上的可疑菌落接种TSA-YE琼脂平板上于35℃纯培养24h后进行菌落颜色、镜检等项目使用。
蓝色菌落检验:用45°光斜射TSA-YE琼脂平板,菌落呈蓝灰色到蓝色。用标准菌株作为阳性对照。将纯培养后的菌落接种于
TSB-YE肉汤,35℃培养24h,供生化等项目检验使用。
典型运动镜检:挑取在TSA-YE琼脂平板上生长良好的菌落于洁净载玻片上,李斯特氏菌为革兰氏阳性小杆菌,大小为
0.4~0.5µm×0.5~2.0µm;用生理盐水制成菌悬液,在油镜或相差显微镜下观察,该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。
过氧化氢酶试验:挑取TSA-YE平板上的菌落于洁净载玻片上,滴加1滴3%的过氧化氢(H2O2)溶液,李斯特氏菌呈过氧化氢
酶阳性反应。
溶血试验:从每个TSA-YE琼脂平板上至少挑取2个菌落刺种血平板,30℃培养24h~48h。将TSB-YE肉汤培养物接种于每种
微量西林瓶内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2
右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。
注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
备注:本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。
三)单核细胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有关菌的区别见表2。(只供参考)表2 单核细胞增生李斯特氏菌生化性状与有关菌的区别
中文菌种 | 溶血试验β | 动力试验 | 尿素酶试验 | 硝酸盐还原 | MR-VP试验 | 三糖铁试验 | 葡萄糖 | 麦芽糖 | 七叶苷 | 甘露醇 | 鼠李糖 | 木糖 |
单核细胞增生李斯特氏菌 | + | + | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | + | + | + | - | + | - |
绵羊李斯特氏菌 | + | + | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | + | + | + | - | - | + |
英诺克李斯特氏菌 | - | - | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | + | + | + | - | Vb | - |
威尔斯李斯特氏菌 | - | + | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | + | + | + | - | Vb | + |
西尔李斯特氏菌 | + | + | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | + | + | + | - | - | + |
格氏李斯特氏菌 | - | + | - | - | +/+ | 产酸 不产H2S | - | + | + | + | - | - |
注: “+” 阳性;“-” 阴性; “V” 反应不定