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致泻大肠埃希氏菌生化鉴定盒

英文名称:

货 号 :071760

规 格 :5种×10次/盒

用途:用于致泻性大肠埃希氏菌生化鉴定

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一)生化管的使用方法

开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。

所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

注意:氰化钾生化管,应尽量将塑帽套紧,以免氰化钾挥发造成假阳性!

二)致泻大肠埃希氏菌生化鉴定盒的详细使用方法

致泻大肠埃希氏菌仅是大肠埃希氏菌中的一小部分。挑取平板分离的可疑的菌落进行革兰氏染色镜检,将疑是致泻大肠埃希氏

菌的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。

注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

三)致泻大肠埃希氏菌生化鉴定特征 (详见下生化鉴定程序图)

1.致泻大肠埃希氏菌生化鉴定程序图:


2.血清学试验

假定试验:挑取经生化试验证实为大肠埃希氏菌的琼脂培养物,用肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌多价O血清和肠道出血性大肠埃希氏菌O157血清作玻片凝集。当与某一种多价O血清凝集时,再与该多价血清所包含的单价O血清作试验。致泻大肠埃希氏菌所包括的O抗原群见表2。如与某一个单价O血清呈现强凝集反应,即为假定试验阳性。

证实试验:制备O抗原悬液,稀释至MacFarland 3号比浊管相当的浓度。原效价为1:160~1:320的O血清,用0.5%盐水稀释至1:40。稀释血清与抗原悬液再10mm×75mm试管中等量混合,做单管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内,经16h后观察结果。如出现凝集,可证实为该O抗原。