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单核增生性李斯特氏菌生化鉴定盒

英文名称:

货 号 :071820

规 格 :10种×10支/盒

用途:单核增生性李斯特氏菌常见的9项生化反应。(参考“食品安全国家标准”GB4789.30-2010)

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071820 单核增生性李斯特氏菌生化鉴定盒(10种×10支)

一)整套试剂及用品

鉴定生化反应的10种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶1 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。

二)生化管的使用方法

开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

三)单核增生李斯特氏菌生化鉴定盒的详细使用方法

挑取选择性培养基上的可疑菌落接种木糖、鼠李糖发酵管36±1℃培养24-48h,同时接种TSA-YE平板30±1℃培养24-48h,

纯培养物供染色镜检和生化试验.

染色镜检:将上述纯培养物做革兰氏染色并做湿片检查;李斯特氏菌为革兰氏阳性小杆菌,大小为0.4~0.5µm×0.5~2.0µm;用生理盐水制成菌悬液,在油镜或相差显微镜下观察,该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动.

过氧化氢酶试验:挑取TSA-YE平板上的菌落于洁净载玻片上,滴加1滴3%的过氧化氢(H2O2)溶液,李斯特氏菌呈过氧化氢酶阳性反应。

将上述可疑菌新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中,与1 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成1McFarland (约3.0×108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。

注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

 

        图1   西林瓶开启图                                      图2   西林瓶放置培养图

四)单核细胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有关菌的区别见表2。(只供参考)

表2  单核细胞增生李斯特氏菌生化性状与有关菌的区别

 

菌种

 

 

溶血反应

 

 

动力试验

 

 

葡萄糖

 

 

麦芽糖

 

 

MR-VP

 

 

甘露醇

 

 

鼠李糖

 

 

木糖

 

 

七叶苷

 

 

单核细胞增生李斯特氏菌

 

L.monocytogenes

 

 

 

 

+

 

 

 

 

 

 

+/+

 

 

 

 

+

 

 

 

 

+

 

 

格氏李斯特氏菌

 

L.grayi

 

 

 

 

+

 

 

 

 

 

 

+/+

 

 

 

 

_

 

 

 

 

+

 

 

斯氏李斯特氏菌

 

L.seeligeri

 

 

 

 

+

 

 

 

 

 

 

+/+

 

 

 

 

 

 

 

 

+

 

 

威氏李斯特氏菌

 

L.welshimeri

 

 

 

 

+

 

 

 

 

 

 

+/+

 

 

 

 

V

 

 

 

 

+

 

 

伊氏李斯特氏菌

 

L.ivanovii

 

 

 

 

+

 

 

 

 

 

 

+/+

 

 

 

 

 

 

 

 

+

 

 

英诺克李斯特氏菌

 

L.innocua

 

 

 

 

 

 

+

 

 

+

 

 

+/+

 

 

 

 

V

 

 

 

 

+

 

 注:  “+” 阳性;“-” 阴性; “V” 反应不定