English

KJD08P 克罗诺杆菌PCR检测试剂盒 24test

英文名称:PCR Detection Kit for Cronobacter spp.

货 号 :KJD08P

规 格 :24 测试/盒

用途:用于食品样本中克罗诺杆菌的检测。

浏览次数:1552次

购买数量:
-
+
联系方式:
商品详细
说明书
微生物图册
行业应用
相关论文

产品名称:克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒
英文名称:PCR Detection Kit for Cronobacter spp.

产品编号与包装规格:

编号规格
KJD08P24 测试/盒

产品简介:本试剂盒基于 PCR 技术,依据国家标准 《GB 4789.40-2024 食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌检验》检验要求设计,适用于食品样本中克罗诺杆菌的检测。

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒检测原理:利用克罗诺杆菌属ITS基因的特异性引物和PCR反应所需试剂,如反应缓冲液、Taq DNA 聚合酶和dNTPs等,加入待检核酸样品,即可进行 PCR 扩增反应。扩增产物电泳后在目标位置处检测到特异性条带时,即为阳性结果。

产品特点:
      1. 快速简便:将酶、引物等反应组分混匀后 进行干粉化处理,增加试剂稳定性,使用 时减少溶液配制步骤,更为便捷,整个检 测反应可在 2 h 内完成;
      2. 特异性高:根据《 GB  4789.40−2024  食品微生物学检验 克罗诺杆菌检验》提供的目标基因引物,经过大量的标准菌株的反复验证,保证扩增反应的高度特异性;
      3. 判读简单:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和成像仪观察目标条带即可判别,直观方便。

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒产品组分:

组分名称规格 × 数量
干粉试剂8 管×3 排
复溶液1 mL×1 管
阳性对照1管(冻干型)
阴性对照1管(冻干型)
裂解液1 mL × 1 管
超纯水1 mL × 1 管
6 × Loading buffer240 μL × 1 管 
说明书1 份

储存条件与保质期:2~8℃条件下储存,有效期 12 个月。

所需其他材料和适用仪器:
      1. PCR 仪器、高速离心机、电泳仪、水平电 泳槽、紫外仪、移液器、移液枪头及离心 管等;
      2. 琼脂糖、溴化乙锭(EB)或其他核酸染料。

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒使用指南:

1,样品前处理
      1) 参照 《GB 4789.40−2024》,从克罗诺杆菌定性检测步骤5.3开始,使用 1 μL 接种环刮取TSA琼脂平板上可疑菌落,悬浮到含 30 μL 裂解液的无菌离心管中,充分悬浮菌体,轻弹管壁消除气泡,99℃加热 10 min;
      2) 12000 r/min 离心 15 min,上清即为粗提 的 DNA,可转移至 0.2 mL 无菌离心管中, 在-20℃下可长期保存。也可用等效商品化的细菌基因组DNA提取试剂盒或全自动核酸提取仪按操作要求提取DNA模板。

2,加样、反应
      1) 首次使用时,分别加入80 μL 超纯水至阳性对照和阴性对照管中,充分溶解,4℃保藏时间不超过 48 h,-20℃存储待用;
      2) 取出冻干粉试剂,按照需求剪取 n 个检测试剂管(n=待检测样品数+1 管阳性对照+1 管阴性对照),每管加入18 μL 复溶液,充分溶解后待用;
      3) 向上述已加入复溶液的 n  个反应管中分 别加入待测样品核酸、阴性对照、阳性对 照各 2 μL ,紧盖后置于 PCR 仪中按设定 的反应程序进行扩增反应;
      4) PCR 反应程序如下:

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒反应程序

3,结果判读:反应后每管中加入4 μL的 6×Loading buffer,混匀,并取 8 μL 样品经1.5%琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像仪下观察,阴性对照无目的条带扩增,阳性对照中出现一条目标条带,大小为282 bp (参照图 1),PCR 试验结果成立。若阴阳性对照管反应结果不符,则本次检测结果无效,应重新检测或与产品技术支持联系。

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒结果判读

克罗诺杆菌 PCR 检测试剂盒使用注意事项:
      1. PCR  实验室区域设计、工作基本原则及 注意事项应参照《疾病预防控制中心建设 标准》(建标 127−2009) 和国家卫生和计划生育委员会(原卫生部)(2010)《医疗机构临床基因扩增管理办法》附录(医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则)。
      使用本试剂盒前请仔细阅读本说明书全文,检测过程中建议穿洁净工作服,戴一次性手套,使用的移液枪头需提前灭菌;
      3. 干粉检测试剂在使用前低速离心,确保所 有的干粉沉在管底,加入复溶液如产生气泡用手指轻弹管壁清除,反应前检查反应 管是否盖紧,避免泄露造成污染;
      4. 试剂盒中反应管材质为聚丙烯,包装盒材 质是纸,使用完毕废弃时按照医疗废弃物 相关规定处理,由使用者自行负责处理;
      5. 不同批号的产品请勿混合使用,请在有效 期内使用试剂盒,由于操作不当引起的误 判,以及由此误判引发的其他事项,本公 司概不负责。