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HKE365-01A NLS-Cas9 Nuclease(核酸酶)

英文名称:NLS-Cas9 Nuclease

货 号 :HKE365-01A

规 格 :50μg/盒

用途:crispr基因编辑(核酸酶)

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产品名称:NLS-Cas9 Nuclease
中文名称:NLS-Cas9 核酸酶

产品编号与包装规格:

编号产品名称规格产品介绍价格
HKE365-01ANLS-Cas9 Nuclease50μg/盒crispr基因编辑(核酸酶)1365

产品描述:CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适 应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相应的CRISPR RNAs (crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列的降解,从而提供免疫性。 人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导 Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,可用于基因敲除 和精确编辑DNA等操作。本试剂盒提供的Cas9核酸内切酶通过在蛋 白两端加了核定位信号(NLS),可使蛋白进入细胞核内进行基因 组编辑。

产品特点:纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。

产品用途:
      1,基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除;
      2,基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入;
      3,sgRNA 剪切靶点DNA 效率检测,降低体内筛选成本;
      4,体外剪切靶 DNA 的特异位点。

应用实例:图例)Cas9 Nuclease做 DNA片段切割活性检测。

NLS-Cas9 Nuclease应用实例

      带有靶位点的DNA片段为6100 bp;
      酶切后的片段为3900 bp和 2200 bp。

保存温度:-20℃保存,或-80℃长期保存。

NLS-Cas9 Nuclease 产品包装(A包装):

产品组成体积
NLS-Cas9 Nuclease(1μg/ μL)50 μL
10×Reaction Buffer500 μL
*HKE365-02 系列为 5 μg/μL浓度,共 10μL。

体外切割体系(20μL):

dsDNA200 ng
sgRNA200 ng
NLS-Cas9 Nuclease0.5-1 μg
10×Reaction Buffer2 μL
RNase Free Water至 20 μL

37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注:可在反应体系中添加 20U 的 RNase Inhibitor,防止 dsDNA 不纯导致 sgRNA 的降解。

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* 为 Cas9(D10A)Nickase,能在与 sgRNA 靶序列互补的 DNA 链上产生切口,从而形成功能性的单链断裂,可以减 少意外的脱靶基因修饰。
** 为 Cas9(H840A)Nickase,能在与 sgRNA 靶序列非互 补的DNA 链上产生切口,从而形成功能性的单链断裂,可以 减少意外的脱靶基因修饰。
*** 为 Cas9(D10A,H840A) Nuclease,具有靶DNA 结合活性, 但无切割活性,可用于阴性对照等用途。