English

深入了解细胞培养基产品类型及其定义

发布时间:2022-04-07    浏览次数:195

在细胞治疗应用的领域中,培养基属于重要的辅助性材料之一,因此,了解细胞培养基(culture media)的分类及定义对于细胞治疗产业显得格外重要,尤其要符合细胞治疗应用的培养基常属于无血清的培养基(serum-free media)。

培养基也因为要符合法规面的要求,培养基的生产最好能也符合GMP的规范,因此大部分细胞治疗公司所使用的培养基都是购自有能力生产临床等级培养基的供应商,如环凯生物。

而常被应用于细胞治疗的细胞类型包含免疫细胞及干细胞,而这些供应商大部分都有自行研发的能力并可生产出专门培养免疫细胞或干细胞的培养基,当然,用于生产培养基的成分及用量通常属于机密,所以使用者一般无法得知培养基内含有的所有成分及成分的来源属性,且不同供应商所生产的培养基常常用不同的名词(term)来描述产品,这很容易让造成使用者的混淆,或是供应商自己误用了这些术语,常常同样的term在不同的供应商则各自有不同的认定及解读,也有一些公司可能因为有商业上的考量,因此用含的术语常常让人混淆不清,导致这些状况的出现主要是目前世界上并没有公认的第三方机构来定义这些名词及术语,有可能在美国、欧洲及亚洲对于同样地名词有着不同的解读,也因为这些原因,对于细胞治疗的开发者是必须有责任去厘清并了解这些供应商对于其产品所标示或描述的名词所代表的意义,以确保该细胞治疗产品的品质。

图. 用于说明细胞培养基分类的示意图:
      以血清为主(SB),无血清(SF),不含异种(XF),无动物成分(ACF),无蛋白质(PF)和化学定义(CD)。

      ♦无血清培养基通常含有纯化的蛋白质,其蛋白可能源于动物或人类,并可能与其他确定和未确定的成分有关联。
      ♦含有纯化人类的培养基、蛋白质和或人血小板裂解物是无血清和无异种的。
      ♦无动物成分的培养基不含人和动物来源的成分,通常含有植物水解物。
      ♦化学成分确定的培养基通常由人重组蛋白质组成。
      ♦不含蛋白质的培养基不含蛋白质,但通常包含水解蛋白质和不明确的天然脂质。

Term

Definition

Supplement example

Alternative terms

Serum-based
(含血清)

培养基含有动物或人类血清

FBS
Human AB serum

 

Serum-free, SF
(无血清)

1、培养基不包含血清或未处理的血浆,但可能内含有大量蛋白成分
2、 虽然不含有血清,但可能包含由血液、血清中分离纯化出的成分,例如albumin, transferrin, low-density lipids, 贺尔蒙或血小板裂解液。另外,也可能含有无法清楚定义的成分,例如组织萃取物(牛脑垂体萃取物)
3、取代血清的使用,通常需要加入额外的添加补充物

Animal/human-derived supplements (platelet lysates, serum fractions)
Animal/plant hydrolysates
A mixture of human/animal-derived or recombinant protein, hormones, growth factors, and lipids.

 

Xeno-free, XF
(无异种成分)

1、仅包含人类来源的补充物(例如,不含动物血清或非人源蛋白质)的培养基
2、Xeno-free的意思有两层涵义,即培养基本身及所有用于制备重组材料的试剂皆必须也是Xeno-free
3、若有使用重组性的材料,则必须是使用人类基因的DNA序列,不能使用非人类的其他动物的DNA,而植物、细菌或酵母菌的DNA是可以使用的。

Human serum or plasma
■ Human-derived supplements (eg, human platelet lysates)
■ Plant hydrolysates
■ A mixture of human-derived or recombinant proteins, hormones, growth factors, and lipids

 

Animal derived component-free,ADCF
(无动物来源成分)

1、培养基组成不含任何来自动物或人类的成分(例如动物/人类的血清&蛋白)
2、培养基可能含由动物细胞株或发酵过程产出的重组蛋白
3、Animal-free的意思有两层涵义,即培养基本身及所有用于制备重组材料的试剂皆必须也是animal-free
4、值得注意的是,当谈到animal-free media时,其中的animal也包含了人类,这也是Xeno-free和animal-free的重要差异点。

Plant hydrolysates
■ A mixture of recombinant materials(proteins, hormones, cytokines, and/orgrowth factors) that are expressed and processed from qualified cell lines

Animal component–free(ACF)
Animal origin–free(AOF)

Chemically Defined
(可定义的化学成分)

1、培养基不含蛋白质、生长因子、水解物或任何未知的成分。
2、此类培养基只包含其化学结构已知的成分,并具有指定的所有化学物质。但是,应该注意的是,该术语的定义在仍然是可变的。化学成分确定的培养基通常含有在合格的细胞系中所表达的重组材料(蛋白质,激素,细胞因子和/或生长因子)的混合物。

Recombinant materials such as proteins, hormones, cytokines, and/or growth factors.

 

Defined
(成分确认)

1、培养基中不含有任何未知的成分,例如血清、血浆、血小板裂解液、组织萃取物、植物来源的水解蛋白。
2、所有的容物成分的来源及纯度皆是已知的且清楚的,但需注意,这不代表内容物成分的纯度是100%,例如,若该培养基含有Bovine serum albumin (BSA),纯度>95%,但仍有5%的成分是未知的。

 

 

Protein-Free
(无蛋白成分)

培养基不含蛋白,但通常包含水解的蛋白成分(eg, HySoy)及小分子的 peptides,例如 insulin 无蛋白的培养基也可能包含不确定的成分,例如native lipids,也因如此,此类培养基可能不属于chemically defined。

Hydrolyzed protien 小分子peptide,例如insulin

 

Clinical-grade

1、该标示显示产品是适合用于临床使用,通常表示该产品已经过临床试验,其安全性及有效性有监管机构的批准,准予用于人体内。
2、临床级产品通常由监管机构批准为药物,其标签或产品文件内应说明其无菌和安全性。
3、临床及的辅助性材料通常仅被批准用于特定之用途。

 

Pharmacopeial-grade Infusible-grade Active pharmaceutical ingredient (API)-grade
Approved for human use

Laboratory-grade

该标示说明该产品或材质仅限于实验或研究目的使用,不能使用于药品、食品或临床医疗

 

Research grade
Research use only
Laboratory use only
Non-pharmaceutical–grade

Research use only (RUO)

1、通常仅限用于研究或临床前(pre-clinical)应用
2、不能使用于临床试验,除非有监管机构合格且经批准用于特定之临床试验用途。

 

Laboratory-grade
Laboratory use only
Non-pharmaceutical–grade
Non-pharmaceutical–grade

Drug master file (DMF)
药品主档案

1、对产品制造者来说,DMF是属于机密性的文件,主要内容包含产品的化学成分、制造过程及品管控制….等。
2、DMF所提供的资讯也许有助于使用单位必须提交的相关法规依循文件,但并不能保证相关的监管机管可以认同或接受。
3、在不同的区域或不同国家,主档案的型式通常也不同,美国的DMF就分成四种类型,而该DMF就无法应用在欧洲的法规单位,在欧盟相似类型的文件就不称为DMF,仅称为master file。

 

Master file (EU)
Regulatory support file (EU)

Good Manufacturing Practice (GMP)

1、指的是current GMP(cGMP)的法规,要求制造商,加工者和包装商采取必要措施确保他们的产品的可追溯性、安全性、纯度和有效性。
2、当该术语与产品或材料相关联时,表示该产品已根据部分或全部cGMP的要求来确保产品有经过适当的设计,包含制造过程、设施和最终产品都有进行监控和控制。
3、产品使者都必须审查产品文件中对于的该产品的预期使用声明书。
4、区域性上的差异,某些国家的法规监管机构有提供GMP的证书给符合GMP等级的辅助型材料,但部分国国并没有提供。

 

cGMP
Manufacture under GMP
GMP-compliant
GMP-grade
Compliant to 21CFR 210,211, 820