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HEPES溶液与PBS缓冲液的对比
发布时间：2022-04-12 浏览次数：3243
生物缓冲液可稳定水溶液的 pH 值，因此被广泛使用于生物实验中。而过去常用的传统缓冲液 ，如碳酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液，在很多生物实验中不适用。这些试剂在 pH 7.5 以上不能有效的缓冲， 并会产生一些干扰反应。因此Norman Good 博士等人于1966 年提出了一系列可解决传统缓冲液限 制的两性离子缓冲液，这些缓冲液的pKa 值等于或接近生理 pH 值，对细胞无毒，且不会通过细胞膜吸收。在此为您整理出较常用的PBS(Phosphate buffered saline)与HEPES使用上的优缺点。
| HEPES | PBS | |
| 有效的pH范围 | 6.8-8.2 | 5.8-8.0 |
| 生物毒性 | 不具生物毒性 | 不具生物毒性 |
| 渗透压 | 使用 0.1 M HEPES 显著提高了培养基的渗透压。 | 具备等渗透压的特性，可防止细胞破裂。 |
| 细胞活力 | HEPES 缓冲系统中可以看到更高的最大细胞密度和活力。 | PBS 稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。 |
| 与金属离子的关系 | 可以忽略不计的金属离子产生络合物或沉淀。 | 与部分金属离子结合会产生络合物或沉淀。 |
| 与酶促反应的关系 | 适合用于酶促反应 | 可能会抑制酶促反应 |
| 在冷冻情况下的变化 | HEPES 溶液的冷冻不会导致 pH 变化。 | PBS 溶液的冷冻导致显著的 pH 变化。 |
| 高压灭菌 | 不可高压灭菌 | 可高压灭菌 |
| 用于电子显微镜研究的前缀固定剂 | Hepes 代替 PBS 避免了这种沉淀 | 由于磷酸盐与二价阳离子有关。较高浓度的PBS会导致严重沉淀，从而阻止细胞有效过滤到过滤器上使用 |
| 用于层析法 | 于层析法中适用 | 于层析法中适用 |
| HClO荧光检测 | 不适用 | 适用 |
