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HEPES溶液与PBS缓冲液的对比

发布时间:2022-04-12    浏览次数:227

生物缓冲液可稳定水溶液的 pH 值,因此被广泛使用于生物实验中。而过去常用的传统缓冲液 ,如碳酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液,在很多生物实验中不适用。这些试剂在 pH 7.5 以上不能有效的缓冲, 并会产生一些干扰反应。因此Norman Good 博士等人于1966 年提出了一系列可解决传统缓冲液限 制的两性离子缓冲液,这些缓冲液的pKa 值等于或接近生理 pH 值,对细胞无毒,且不会通过细胞膜吸收。在此为您整理出较常用的PBS(Phosphate buffered saline)与HEPES使用上的优缺点。

HEPES与PBS对比

 HEPESPBS
有效的pH范围6.8-8.25.8-8.0
生物毒性不具生物毒性不具生物毒性
渗透压使用 0.1 M HEPES 显著提高了培养基的渗透压。具备等渗透压的特性,可防止细胞破裂。
细胞活力HEPES 缓冲系统中可以看到更高的最大细胞密度和活力。PBS 稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。
与金属离子的关系可以忽略不计的金属离子产生络合物或沉淀。与部分金属离子结合会产生络合物或沉淀。
与酶促反应的关系适合用于酶促反应可能会抑制酶促反应
在冷冻情况下的变化HEPES 溶液的冷冻不会导致 pH 变化。PBS 溶液的冷冻导致显著的 pH 变化。
高压灭菌不可高压灭菌可高压灭菌
用于电子显微镜研究的前缀固定剂Hepes 代替 PBS 避免了这种沉淀由于磷酸盐与二价阳离子有关。较高浓度的PBS会导致严重沉淀,从而阻止细胞有效过滤到过滤器上使用
用于层析法于层析法中适用于层析法中适用
HClO荧光检测不适用适用