English

无血清细胞培养基的秘密

发布时间:2022-05-10    浏览次数:80

细胞培养技术在生命科学研究领域是不可或缺的。在科研上,细胞培养基(medium)一般都会加入血清(Serum)来补充蛋白质(protein)、生长因子(growth factor)或其他营养物质(nutrients)等,大部分细胞培养会选择使用胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)。近年来也陆续有多样的血清种类,例如:人类血小板生长因子(platelet-rich plasma, PRP)、小牛血清(bovine growth serum, BGS )等,环凯集团供应 的 胎牛血清 (FBS) 可用于敏感细胞系培养、细胞学验证、抗体药物开发、小鼠胚胎干细胞培养、杂交瘤细胞培养、昆虫细胞培养、病毒包装等,其细胞增殖检査克隆率均≥90%。

细胞培养-无血清细胞培养基的秘密

为什么要发展无血清培养基?

顾名思义,无血清培养基(serum-free medium, SFM)系指不含任何血清成分的合成培养基。近年来,因为细胞治疗(cell therapy)的快速发展与生物工业上的制备抗体、病毒抗原或是重组蛋白表达时,细胞培养基中的血清成分复杂,可能会影响制程或是增加不稳定的因素,因此,无血清培养基成为其目标,现今已有许多成熟的产品可供应研究人员做选择。

血清培养基的缺点

血清是一种成分极为复杂的混合物,为细胞培养增添了许多不可控制的变因。含有血清的培养基缺点如下:
(1) 价格昂贵,血清的费用约占细胞培养费用的50-60%。
(2) 血清可能会带有污染源,FBS最常见的即为支原体或黑胶虫污染。
(3) 血清中复杂的成分会使疫苗、细胞因子、单克隆抗体等的分离或纯化带来很大的困扰。

无血清培养基的优点

♦ 避免血清批次间的差异,提高细胞培养的可重复性。
♦ 避免血清自身的污染源污染。
♦ 避免血清成分影响研究结果或是产品制程。
♦ 提高产品表达水平并易于纯化。

无血清培养基的秘密

无血清培养基(SFM)的主要成分为基础培养基和添加物,每家厂商的无血清培养基的基础成分其实大同小异,重要的是其中的添加的黏附因子与生长因子等。其主要成分为下列几种:
      黏附因子:约有80%的细胞是属于贴附型生长。一般的细胞培养基是利用血清作为其来源,在无血清培养基中,细胞黏附因子就是很重要的物质,一般多为细胞外基质(Extracellular Matrix)的组成分,例如:laminin、collagen、fibronectin等,这些成分可以帮助细胞贴附并维持细胞生长型态。
      生长因子:生长因子是维持细胞活性与促进细胞增生、迁移、分化等,不可或缺的要素。
      酶抑制剂:贴附型细胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)进行继代。在一般细胞培养中,FBS就含有抑制trypsin的成分,当加入新鲜含有FBS的medium时便会终止trypsin的反应,所以无血清培养基必须添加trypsin抑制剂。