干粉培养基配置及使用时可能出现的问题与分析
发布时间：2022-06-22 浏览次数：2095
1，使用干粉培养基需要注意的问题
1) 干粉培养基及原材料
● 适宜保存在温度为15 ~ 30°C的阴凉干燥的环境中
● 应在产品外包装上标注开封使用的日期
● 使用前应检查干粉的理化属性是否正常
2) 玻璃与塑料器皿
● 采用优质低碱性的硅酸盐材料的玻璃器皿
● 避免洗涤剂残留在器皿的表面
● 滴加酸碱指示剂检验器皿上酸或碱的残留，如滴加几滴溴甲酚紫，酸性则指示剂呈黄色，碱性则指示剂呈蓝色
● 弃去有蚀刻划痕或破裂的器皿
3) 仪器设备
● 定期对实验室仪器设备进行校准，如天平、pH计、高压灭菌锅、水浴锅等
4) 水
● 使用蒸馏水或去离子水
5) 溶解培养基
● 按照标签上的说明准确称量培养基
● 加入适量的蒸馏水或去离子水加热至完全溶解，溶解过程中不断搅动培养基溶液，避免局部过热
6) 高压灭菌
● 按照标签上的说明设定一定的温度和时间高压灭菌
● 超过规定的灭菌时间或温度，可能造成培养基中营养成分或某些抑制剂的破坏
7) 附加试剂
● 产品需要单独添加的试剂(抑菌剂、血、血清等)必须是在培养基灭菌后冷却至50C左右时加入
● 加入附加试剂后，需充分混匀
8) 培养基灭菌后分装
● 分装前使培养基冷却至50C左右，并摇匀培养基
● 在超净台或超净间迅速分装。若铺平板，分装培养基后，掀盖敞开- -小口，使培养基表面干燥
9) 保存
● 一般来说，对于配制好的培养基，密封包装后放置2~ 8C冰箱中可保存1~2周
2、干粉培养基配制中的常见问题及原因
1) pH改变
● 配制培养基使用的水不符合要求
● 配置过程中培养基温度过高，超过标签上规定的灭菌温度或时间
● 没有加热充分溶解
● 反复复溶
● 保存条件不当
● 器皿上有残留的化学试剂
● 未在培养基冷却时测定pH
2) 出现沉淀、浑浊
● 配制培养基使用的水不符合要求
● 没有充分加热溶解
3) 颜色变深
● 局部加热过度出现焦化
● 反复复溶
4) 凝胶强度下降
● 加入水的量不准确
● 培养基中的琼脂没有完全溶解
● 培养基的pH值不正常
● 反复复溶
5) 菌生长差或者菌落不典型
● 加热灭菌时间过长
● 反复复溶
● 未充分混匀培养基
● 添加抗生素等试剂的量不准确
● 染菌
