食品微生物学样品的采集要求探讨
发布时间：2023-03-03 浏览次数：689
来源：六扇门Study公众号原创文章
样品采集作为检验的第一步★
样品采集作为检验的第一步，是获得检验数据的基础, 若抽样或采样不合理, 会导致实验结果失准, 不能获得有效的数据。
故在食品的卫生监督检验中, 样品采集起着举足轻重的作用, 尤其是微生物样品的采集。
检验过程中的采样、运送、保存或制备等任何一步操作不当均可导致样品不具有代表性，直接影响实验室微生物检验结果的准确性, 导致检验工作无效。
黄启红等人针对食品微生物学样品采集操作规程进行了探讨，小六汇总部分关于“采集要求”的内容，分享给大家，希望可以为大家提供参考。
01 随机性、代表性、真实性
样品的采集一般应遵循随机性、代表性、真实性的原则。从整体中采集可代表其组成和质量的一小部分, 通过样本来判断整批产品是否合格, 不能任意抽取一部分作为分析样品, 必须保证物质的代表性。
随机性一般采用整群随机抽样、分层随机抽样、分段随机抽样和系统随机抽样, 有时根据检验的目标, 兼顾检样的代表性和随机性。
简单随机抽样法, 通常情况下需将个体一一编号利用随机号码表或其他随机方法, 作放回或不放回抽样, 抽取特定号码的个体, 因此总体容量不大时, 简单随机抽样是一种有效的抽样方法。
分层随机抽样必须满足总体中的任一 m 个体都必定属于且只属某一层, 每一层的个体数目是确切的, 在任何两层进行的抽样都相互独立, 一般当获得的资料分布不均或呈偏态分布时, 分层抽样是一种有效的抽样方法; 分段随机抽样时, 要求每个区域内部的差异大些, 区域之间的差异要小些, 这样的效果才会比较好。
系统随机抽样是从总体中每隔K个个体抽取一个样本, K为抽样比值, 比值是总容量 N 与样本容量 n 之比, 即 K＝N/n。当比值 K 已知时, 利用随机数或随机号码确定随机起点, 于是, 可从总体中抽取部分个体组成样本。
02 遵循无菌操作程序
采用过程中为防止带入杂质或污染, 采样方法要尽量简单, 处理装置尺寸适当。
微生物采样过程应严格遵循无菌操作程序, 采用干热或湿热等方法对采样工具进行灭菌或消毒, 处理后包装完好以备采样使用, 采样用的工具不能重复使用, 防止交叉和一切有可能带来的外界污染。
容器必须清洁、防漏、灭菌、广口、干燥, 大小适合以方便盛放各种检样, 准备多种款式以备不时之需。
不同样本如何规范采样？案例
3.1 液体样本
🪐需要用到的耗材
1、无菌水样袋
2、酒精棉
3、记号笔
4、一次性手套等
🪐采样操作
1、先用记号笔在无菌袋上做好标识。
2、采消毒双手后，用酒精棉消毒旋盖口（不要重复擦拭），消毒出水口，然后进行样本采集。
3、采集后马上旋紧完成（采集过程中旋盖保持在手中）。
02 固体样本
✨需要用到的耗材
1、无菌采样袋
2、无菌镊子、铲子等
3、酒精棉
4、记号笔
5、一次性手套等
✨采样操作
1、用酒精棉擦拭无菌采样袋口，进行消毒，手拉开两边系带打开无菌袋。（不可来回擦拭）。
2、使用规定的采样工具（一次性工具或已灭菌的镊子、铲子等工具)取样放入无菌袋，取到适量后密封无菌袋。
3、采样完成后，应立即密封采样袋，注意手部不要碰到封边袋口。做好相关标识，并按照要求进行贮存。
03 空气采样
📒需要用到的仪器、耗材
1、含营养琼脂培养基的平板（直径9 cm）
2、记号笔
3、一次性手套等
4、浮游菌采集器（浮游菌采集需要）
📒采样操作
室内面积不超过30m２，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m２，设东、西、南、北、中5点，周围4点距墙1 m。
采样时，将含营养琼脂培养基的平板（直径9 cm）置采样点（约桌面高度），打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min。（浮游菌采集参照各厂家仪器操作）
📒沉降菌和浮游菌采集差异
沉降菌
优点是：
（1）无需特殊设备。
（2）干扰较少，采样时间长，有利于监控生产全过程。
缺点是：
（1）半定量，不能体现空气微生物实际浓度。
（2）易受空气微小气候影响，要求检验者操作规范。
（3）不适用于高洁净度区域。
浮游菌
优点是：捕获效率更高，可定量监测空气微生物浓度，结果更被承认。
缺点是：
（1）测试时间较短，仅反映采样当时的空气微生物污染状态。
（2）需要特定仪器。
（3）采样仪器本身也可能是潜在的污染源。
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