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几种常见贴壁细胞培养技巧
发布时间：2023-06-06 浏览次数：1434
细胞生长特性分为两种，一种是贴壁一种是悬浮，不同的细胞形态对应的操作方法也大有不同，今天我们主要讲解一下贴壁细胞的相关培养技巧。
在操作贴壁细胞过程中，最重要的一个环节就是消化，消化时间需要根据每个细胞的状态来调整，消化过度或者消化不充分都会对细胞造成影响。
贴壁细胞状态，分为以下几种：
1 疏松贴壁细胞
细胞传代密度控制在80%左右最少不能低于60%，消化时间控制在1-2分钟左右，传代后48小时内不要动该细胞，让其慢慢贴壁，需要观察时也要轻拿轻放。
如果液体中还有没有贴壁的细胞，在下次换液时，可离心收集细胞。
2 容易分化的细胞
需使用较好的血清培养，尽量让细胞生长密度高一些，消化时观察细胞的形态变化，变圆后及时终止消化处理。
减少吹打次数，避免不必要的机械损伤；轻柔吹打，避免气泡产生，细胞呈单个状态即可。
3 生长缓慢的细胞
如果细胞突然生长缓慢，需考虑是否是试剂的批次问题，细胞污染等可能性。如果本身细胞生长较慢，需使用较好的血清培养，必要时可加大血清浓度（5%-10%左右），传代时密度需在80%以上，密度太稀传代会直接影响细胞的生长周期及状态，传代比例控制在1:2或1:3。
4 聚团成长的细胞
聚团成长的细胞不容易生长满，在长到70%-80%左右就可以传代，消化时观察细胞的形态变化，细胞变圆并有少量细胞脱落即可终止消化，较难消化的细胞，可以分次消化，相对增加消化时间。
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