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培养基的分装与储存

发布时间:2024-05-22    浏览次数:271

培养基的分装

培养基的分装应根据使用的目的和要求分装于不同的容器中,有的分装后灭菌,有的则灭菌后再无菌操作分装,但分装量最大不宜超过容器容量的1/2,以免高压灭菌时溢出或不能充分混匀。

1. 增菌培养基:分装量约为容器容量的1/3~1/2,浓缩的培养基还可根据浓缩倍数减少分装量。

2. 生化试验培养基:一般使用10 x100mm试管每管分装2~3mL。

3. 半固体培养基:分装量约为试管长度的1/3~1/2,灭菌后直立凝固备用。

4. 琼脂斜面:分装量约为试管容量的1/5,灭菌后趁热放成斜面使之凝固,斜面长度约为试管长度的 2/3。

5. 琼脂平板:将灭菌或加热熔化的培养基冷至50℃左右,以无菌手续倾人灭菌平皿内,内径9cm的平皿一般需倾注13~15mL(MH琼脂应25mL)。注意倾注培养基时平皿要放平,以保证培养基均匀平铺于皿底,并勿将皿盖全启开,以免空气中细菌及尘埃落入。新制备的平板培养基凝固后表面会形成一定量的凝集水,影响细菌的分离效果,通常可将平皿倒扣于37℃培养箱内约30min,待培养基表面无水滴后使用。

分装培养基时还应注意以下两点:
     (1) 各种分装容器应清洁干净,最好经干烤灭菌后使用,以利于培养基的彻底灭菌。
     (2) 每批培养基应另外分装2支,每支10mL,随该批培养基同时灭菌,以备测定该批培养基的最后pH之用。

培养基的储存

制成的培养基,不宜保存过久,最好现用现配。确需储存一定时间的培养基,每批应注明日期,严格密封置于2℃~8℃冰箱保存。试管培养基一般可保存3~6个月,平板培养基密封于塑料袋内可保存2~4周。我们将巧克力色血琼脂,用一次性塑料平皿,密封储存于2℃~8℃冰箱,1月内无明显变化,接种脑膜炎奈瑟菌仍生长良好。培养基的避光保存尤为重要,据报导,培养基日光直射15min,培养细菌时可能会导致细菌特性的改变。培养基不宜多次反复加热。有的培养基不宜在冰箱保存,如用于无菌试验的流体硫乙醇酸盐培养基,因含有少量琼脂,在低温下易凝固,影响需氧菌生长,若反复加热,可能会产生絮状物,影响结果的观察。此培养基应放30℃以下的室温避光保存,尽早使用。

干燥培养基在冷、暗、干燥处密封保存,保质期可达2~3年。其保质期长短与培养基成分及其生产、储存环境、密封程度密切相关。

不同的培养基保存时间存在差异,无论何种培养基,关键是保存条件和培养基质量变化,只要发生浓缩、干裂、颜色变化、有菌生长或干粉培养基潮解,就应废弃不用。反之,经测试质量无变化时,仍可使用。

来源:《微生物培养基实用手册》电子书
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