培养基的分装与储存
发布时间：2024-05-22 浏览次数：865
培养基的分装
培养基的分装应根据使用的目的和要求分装于不同的容器中，有的分装后灭菌，有的则灭菌后再无菌操作分装，但分装量最大不宜超过容器容量的1/2，以免高压灭菌时溢出或不能充分混匀。
1. 增菌培养基：分装量约为容器容量的1/3~1/2，浓缩的培养基还可根据浓缩倍数减少分装量。
2. 生化试验培养基：一般使用10 x100mm试管每管分装2~3mL。
3. 半固体培养基：分装量约为试管长度的1/3~1/2，灭菌后直立凝固备用。
4. 琼脂斜面：分装量约为试管容量的1/5，灭菌后趁热放成斜面使之凝固，斜面长度约为试管长度的 2/3。
5. 琼脂平板：将灭菌或加热熔化的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径9cm的平皿一般需倾注13~15mL(MH琼脂应25mL)。注意倾注培养基时平皿要放平，以保证培养基均匀平铺于皿底，并勿将皿盖全启开，以免空气中细菌及尘埃落入。新制备的平板培养基凝固后表面会形成一定量的凝集水，影响细菌的分离效果，通常可将平皿倒扣于37℃培养箱内约30min，待培养基表面无水滴后使用。
分装培养基时还应注意以下两点：
(1) 各种分装容器应清洁干净，最好经干烤灭菌后使用，以利于培养基的彻底灭菌。
(2) 每批培养基应另外分装2支，每支10mL，随该批培养基同时灭菌，以备测定该批培养基的最后pH之用。
培养基的储存
制成的培养基，不宜保存过久，最好现用现配。确需储存一定时间的培养基，每批应注明日期，严格密封置于2℃~8℃冰箱保存。试管培养基一般可保存3~6个月，平板培养基密封于塑料袋内可保存2~4周。我们将巧克力色血琼脂，用一次性塑料平皿，密封储存于2℃~8℃冰箱，1月内无明显变化，接种脑膜炎奈瑟菌仍生长良好。培养基的避光保存尤为重要，据报导，培养基日光直射15min，培养细菌时可能会导致细菌特性的改变。培养基不宜多次反复加热。有的培养基不宜在冰箱保存，如用于无菌试验的流体硫乙醇酸盐培养基，因含有少量琼脂，在低温下易凝固，影响需氧菌生长，若反复加热，可能会产生絮状物，影响结果的观察。此培养基应放30℃以下的室温避光保存，尽早使用。
干燥培养基在冷、暗、干燥处密封保存，保质期可达2~3年。其保质期长短与培养基成分及其生产、储存环境、密封程度密切相关。
不同的培养基保存时间存在差异，无论何种培养基，关键是保存条件和培养基质量变化，只要发生浓缩、干裂、颜色变化、有菌生长或干粉培养基潮解，就应废弃不用。反之，经测试质量无变化时，仍可使用。
来源：《微生物培养基实用手册》电子书
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