产品名称：Lac启动子自诱导培养基
其他叫法：Lac自诱导型培养肉汤
产品编号与包装规格：
| 产品编号 | 产品类型 | 包装规格 |
|---|---|---|
| SM01A1 | 即用型成品 | 500mL |
产品用途：用于含lac启动子质粒的大肠杆菌培养。
自诱导培养基原理原理：
葡萄糖作为半乳糖操纵子的阻遏因子阻止细菌利用α-乳糖，而被优先代谢，促进细菌高密度生长。一旦培养基中的葡萄糖被耗尽（通常发生在对数期的后期），乳糖被ß-半乳糖苷酶转换成异乳糖（葡萄糖-1,6-半乳糖），而后者作为IPTG诱导型启动子的诱导剂，引起乳糖阻遏子从与DNA结合的位点上释放，启动重组蛋白的表达。对于DE3基因型的E.coli中，异乳糖使T7 lac启动子去阻遏，并诱导lacUV5启动子表达T7 RNA聚合酶。通常，外源蛋白在细菌中表达时常使用IPTG诱导的启动子，如lac启动子。
图1 lac操纵子负调控
1) 无乳糖时，操纵子被阻遏。lac I基因表达产生阻遏物（绿色），阻遏物结合操纵基因（operator），阻止RNA聚合酶转录lac基因。
2) 有乳糖时，诱导物（inducer，黑色）与阻遏物结合，改变了阻遏物的构象，使其不在与操纵基因结合，阻遏物脱离操纵基因，RNA聚合酶起始结构基因的转录，产生多顺反子mRNA，进而翻译产生β-半乳糖苷酶、透性酶和转乙酰酶。
Lac自诱导型培养肉汤使用方法：
1. 将构建好的质粒转化入宿主细菌，涂于LB 平板上（需要加入适当浓度的抗生素），37℃培养过夜。
2. 挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗生素的液体 LB 培养基中，37℃培养直到菌液浑浊（一般需要 6-8 小时）。
3. 将上步所得菌液按1%的体积比例加入Lac自诱导培养基中，同时加入适当的抗生素。注意：在Lac自诱导培养基中，如果使用卡拉霉素，其终浓度比一般的培养基高，需要 100 ug/mL。由于本方法所得菌液密度大，故需要大量氧气，因此培养基的体积不能超过培养瓶的五分之一，使氧气供应更充分。
4. 37℃培养过夜。
5. 次日收集菌液并按常规操作进行蛋白纯化步骤
