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产品名称：动物源成分（猪肉）核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
英文名称：PCR Detection Kit for pork component (Fluorescent Probe Assays)
产品编号与包装规格：
| 编号 | 规格 |
|---|---|
| FZ105BF2 | 48 测试/盒 |
产品简介：本试剂盒仅适用于食品中动物源成分的定性检测，其他试验需另按照《GB/T 38164-2019 常见畜禽动物源性成分检测方法实时荧光定量PCR法》开展。
检测原理：基于Real Time PCR技术，利用针对于动物源成分相关基因的引物、荧光探针以及其他反应所需试剂，加入待检样品即可进行扩增反应。在发生扩增过程中，荧光探针与目的基因片段结合，可被Taq酶分解并产生荧光信号，此时荧光定量PCR仪可识别该荧光信号，同时根据其强弱变化绘制出相应的实时扩增曲线，进而判定目标成分是否检出。
产品组分：
储存条件与保质期：-20℃避光储存，有效期为12个月，避免反复冻融。
灵敏度：最低检验限达到10-10~10-9 ng/μL。
所需其他材料和适用仪器：荧光定量PCR仪（具有能够检测FAM标记的荧光通道）、高速离心机、移液器、移液枪头及离心管等。
动物源成分(猪肉)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)使用指南：
1、样品前处理
1) 样品模板DNA的制备：
a) 参照GB/T 35918-2018《动物制品中动物源性检测基因条码技术 Sanger 测序法》的方法提取；也可用等效DNA提取纯化试剂盒进行模板DNA制备；
b) 将洗脱获得目标样品DNA，即为含有目标菌的DNA模板，置于-20℃保存备用。
2、加样、反应
按照需求取n个预混液反应管（n=1管阴性对照+待检测样品数+1管阳性对照），不足8个反应可以剪下所需的管数使用。 使用前，保持盖子盖紧，短暂离心待用。
向上述n个反应管中分别加入阴性对照、待测样品DNA、阳性对照各5 μL，总反应体积为25 μL。盖紧管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。
PCR反应体系为25 μL，取FAM检测通道，在反应阶段2中60℃时收集荧光信号，具体程序如下：
注：在反应阶段2中60℃时收集荧光信号，对于多通道荧光PCR仪，取 “FAM”为信号采集通道，淬灭基团选择“None”，染料校正选择“None”。
3）检验结果方法：
一般情况下，可通过软件自动设定的基线、阈值等直接读取检测结果。如需调整，可根据所使用仪器的自身情况（如噪声等）以及选取的不同荧光通道进行调整。
质量控制：阴性对照未出现明显的S型扩增曲线或Ct值≥37，阳性对照出现S型扩增曲线且其Ct值≤34。若阴阳性对照不同时满足上述条件，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。
结果判读（根据反应所得Ct值判读，具体见下表）：
动物源成分(猪肉)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)使用注意事项
实验环境条件和过程控制应参照GB/T 27403《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》规定执行。
使用本试剂盒前请仔细阅读本说明书全文，检测过程中建议穿洁净工作服，戴一次性手套，使用的移液枪头需提前灭菌。
试剂盒中试剂使用前需充分融化、混匀，短暂离心后使用，期间需尽量避免产生气泡，加样完毕后检查反应管是否盖紧，避免泄露造成污染。
待检测样品基因变异可能会造成假阴性结果；待检测样品交叉污染、实验室环境污染以及试剂污染均会造成假阳性结果。
不同批号的产品请勿混合使用，请在产品有效期内使用试剂盒，由于操作不当引起的误判，以及由此误判引发的其他事项，本公司概不负责。
检测完毕后，根据相关规定正确处理废弃耗材以及扩增产物。
