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为什么有些微生物必须用血琼脂或巧克力平板?营养需求解析

发布时间:2026-04-30    浏览次数:68

某些微生物必须使用血琼脂或巧克力平板,是因为它们属于营养要求苛刻的“苛养菌”(fastidious organisms),在普通基础培养基(如营养琼脂、肉汤等)上无法生长或生长极差。这类细菌对培养基中的特定生长因子有严格依赖,而这些因子通常只存在于哺乳动物血液中。

下面从营养需求角度详细解析:

一、血琼脂(Blood Agar Plate, BAP)的营养特点

血琼脂 = 基础培养基(如哥伦比亚琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂) + 5%~10% 脱纤维羊血/马血

提供的关键成分:

  • 碳源、氮源、氨基酸、维生素、无机盐(来自基础培养基)
  • 额外生长因子(来自血液):
    • 血红素(X因子)

    • 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD,即V因子)

    • 其他尚未完全明确的促生长物质

主要用途:

  • 支持链球菌属(如肺炎链球菌、化脓性链球菌)、葡萄球菌等中度苛养菌生长

  • 观察溶血现象(α、β、γ溶血),用于细菌初步鉴定

⚠️ 注意:普通血琼脂不能支持嗜血杆菌(Haemophilus)生长,因为其中的X和V因子被红细胞包裹,未释放。


二、巧克力平板(Chocolate Agar)的特殊处理

巧克力平板 = 血琼脂 经80–90℃加热处理

加热的作用:

  • 裂解红细胞,释放出:
    X因子(血红素,hemin)
    V因子(NAD 或 NADP)

这两种因子是嗜血杆菌(如流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae绝对必需的生长因子

为什么叫“巧克力”?

  • 因加热后血液呈深棕色,类似巧克力颜色,并非添加了巧克力

主要用途:

培养高度苛养菌,包括:

  • 流感嗜血杆菌(需X+V因子)

  • 奈瑟菌属(如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌)

  • 某些放线菌和弯曲菌

✅ 巧克力平板也常置于5% CO₂环境中培养,进一步促进苛养菌生长。


三、典型苛养菌及其营养需求对比

微生物

是否能在普通琼脂生长?

所需特殊因子

推荐培养基

金黄色葡萄球菌

普通血平板即可

肺炎链球菌

否(或极弱)

需血液中的未知因子

血琼脂(α溶血)

化脓性链球菌

(A群链球菌)

需血液

血琼脂(β溶血)

流感嗜血杆菌完全不能X因子 + V因子巧克力平板

(或加X+V因子的培养基)

脑膜炎奈瑟菌

需血液及CO₂

巧克力平板 + 5% CO₂


四、总结:为什么必须用血琼脂或巧克力平板?

原因

说明

缺乏合成关键生长因子的能力

苛养菌自身无法合成X/V因子、某些氨基酸或辅酶

普通培养基营养不足

基础培养基不含血液成分,无法提供必需因子

临床分离需要高敏感性

若不用合适培养基,可能导致假阴性,漏诊严重感染(如脑膜炎、败血症)

辅助鉴定功能

血琼脂可观察溶血类型,巧克力平板支持特定病原体生长,便于后续生化或分子鉴定


附:实用提示

  • 血琼脂 ≠ 巧克力平板:前者用于中度苛养菌+溶血观察,后者用于高度苛养菌。

  • 若怀疑流感嗜血杆菌感染(如儿童脑膜炎、会厌炎),必须接种巧克力平板,仅用血平板会漏检。

  • 实验室常将血平板 + 巧克力平板 + 麦康凯平板组合使用,覆盖革兰阳性、革兰阴性及苛养菌。


因此,血琼脂和巧克力平板不仅是“营养更丰富”的培养基,更是满足特定病原微生物不可替代生理需求的关键工具,在临床微生物诊断中具有不可替代的地位。