产品名称：嗜肺军团菌核酸快速检测试剂盒
英文名称：Rapid Detection kit for legionella pneumophilia
产品编号与包装规格：
| 编号 | 规格 |
|---|---|
| KJD15L | 24 测试/盒 |
产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP），用于包装饮用水等水体中嗜肺军团菌的快速检测，可借助显色指示剂颜色变化直接判读结果。
检测原理：利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶，使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60~65℃）进行连续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接通过颜色变化判读结果。
产品特点：
1. 快速简便：将酶、引物等反应组分混匀后进行干粉化处理，增加试剂稳定性，使用时减少溶液配制步骤，更为便捷，整个检测反应可在1 h内完成；
2. 特异性高：利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引物，保证扩增反应的高度特异性；
3. 灵敏度高：最低检验限达到8 CFU/Test；
4. 判读简单：反应前加入显色指示剂，反应后通过肉眼观察反应液颜色变化或者经荧光监测仪器跟踪荧光图谱的变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应后开盖造成的气溶胶污染。
嗜肺军团菌核酸快速检测试剂盒产品组分：
储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。
适用仪器：
1. PCR仪器或金属浴恒温器。
2. 高速离心机，用于样品前处理。
样品类型：增菌液、可疑菌落样品以及DNA样品等。
嗜肺军团菌核酸快速检测试剂盒使用指南：
1，样品前处理
A. 样品增菌液模板DNA的制备：
a) 取样过程参考国标《GB/T 18204.3-2013 公共场所卫生检验方法 第3部分：空气微生物》，或各实验室自行建立的方法。取样后可接种到100 mL GVPC液体培养基中，放置二氧化碳培养箱36 ℃±1 ℃培养，增菌时间不低于12 h；
b) 取以上增菌液1 mL到1.5 mL规格的无菌离心管中，6000 r/min离心5 min，完全去除上清；
c) 加入30 μL裂解液充分悬浮管底沉淀，轻弹管壁消除气泡，99℃加热10 min。
d) 12000 r/min离心15 min，上清即为待测样品DNA，静置冰上，长时间不用应再次离心
B. 可疑菌落模板DNA的制备：挑取可疑菌落半环到含30 μL裂解液的无菌离心管，充分悬浮后按照上述步骤c)、d)操作。
2，试剂混合、加样
A. 阴、阳性对照复溶：首次使用时，加入80 μL超纯水至阳性对照和阴性对照冻干粉中，待溶解后混匀，-20℃存储待用。
B. 干粉试剂复溶、加样：
1)取出冻干粉试剂，按照需求剪取n个检测试剂管（n=待检测样品数+1管阳性对照+1管阴性对照），每管加入复溶液20 μL；
2)向上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示剂2.5 μL；
3)向上述n个反应管中依次分别加入阴性对照、待测样品DNA、阳性对照各2.5 μL，每个加样后立刻盖紧盖子。
3，扩增反应：使用能够提供恒温条件的仪器（有热盖功能优先），设置温度到64℃，放入检测管恒温反应50 min。
4，结果判读：反应结束后在自然光线充足的环境条件下，将样品置于白色背景下观察，阴性对照检测管呈淡橙色，阳性对照检测管呈荧光绿，待测样品反应管以此作为对照进行判读，若阴阳对照反应管任一结果与上述情况不符，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。
LAMP检测操作指南
LAMP使用方法
