产品名称：幽门螺杆菌核酸检测试剂盒(荧光探针法)
英文名称：Nucleic Acid Test Kit for Helicobacter Pylori (Fluorescent Probe Assays)
产品编号与包装规格：
| 编号 | 规格 |
|---|---|
| FZ026BF2 | 48 测试/盒 |
产品简介：本试剂盒仅限用于科研实验场景下幽门螺杆菌的定性检测，不适用于临床诊断或其他非科研用途。
检测原理：基于Real Time PCR技术，利用针对于幽门螺杆菌的特异性引物、荧光探针以及其他反应所需试剂，加入待检样品即可进行扩增反应。在发生扩增过程中，荧光探针与目的基因片段结合，可被Taq酶分解并产生荧光信号，此时荧光定量PCR仪可识别该荧光信号，同时根据其强弱变化绘制出相应的实时扩增曲线，进而判定幽门螺杆菌是否检出。
幽门螺杆菌核酸检测试剂盒(荧光探针法)产品组分：
储存条件与保质期：-20℃避光储存，有效期为12个月，避免反复冻融（推荐分装储存）。
灵敏度：最低检验限达到100 CFU/Test。
所需其他材料和适用仪器：荧光定量PCR仪（具有能够检测FAM标记的荧光通道）、高速离心机、移液器、移液枪头及离心管等。
幽门螺杆菌核酸检测试剂盒(荧光探针法)使用指南：
1，样品前处理
本试剂盒提供从可疑幽门螺杆菌菌落中快速制备qPCR检测用DNA模板的方案，适用于纯培养物的核酸提取。其他样本类型（如食品、水样）需另行优化样本前处理流程。
纯菌落DNA的制备：无菌接种环挑取一环可疑菌落充分悬浮于30~100 μL裂解液中，吹吸混匀，沸水浴或100℃金属浴10 min，13000 rpm离心5min，吸取上清液作为DNA模板（也可用商品化核酸提取试剂盒进行DNA提取）。
2, 加样、反应
1) 按照需求取n个PCR反应管（n=1管阴性对照+待检测样品数+1管阳性对照），从试剂盒中取出预混液，充分融化，涡旋后短暂离心，以上每管加入20 μL预混液，待用。
2) 向上述n个反应管中分别加入阴性对照、待测样品DNA、阳性对照各5 μL，总反应体积为25 μL。盖紧管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。
3) PCR反应体系为25 μL，取FAM检测通道，在反应阶段2中56℃时收集荧光信号，具体程序如下：
注：在反应阶段2中56℃时收集荧光信号，对于多通道荧光PCR仪，取 “FAM”为信号采集通道，淬灭基团选择“None”，染料校正选择“None”。
3, 结果：一般情况下，可通过软件自动设定的基线、阈值等直接读取检测结果。如需调整，可根据所使用仪器的自身情况（如噪声等）以及选取的不同荧光通道进行调整。
1) 质量控制：阴性对照未出现明显的S型扩增曲线或Ct值＞35，阳性对照出现S型扩增曲线且其Ct值＜30。若阴阳性对照不同时满足上述条件，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。
2) 结果判读：（根据反应所得Ct值判读，具体见下表：）
注意事项：
1、实验环境条件和过程控制应参照GB/T 27403《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》规定执行。
2、使用本试剂盒前请仔细阅读本说明书全文，检测过程中建议穿洁净工作服，戴一次性手套，使用的移液枪头需提前灭菌。
3、试剂盒中试剂使用前需充分融化、混匀，短暂离心后使用，期间需尽量避免产生气泡，加样完毕后检查反应管是否盖紧，避免泄露造成污染。
4、待检测样品基因变异可能会造成假阴性结果；待检测样品交叉污染、实验室环境污染以及试剂污染均会造成假阳性结果。
5、不同批号的产品请勿混合使用，请在产品有效期内使用试剂盒，由于操作不当引起的误判，以及由此误判引发的其他事项，本公司概不负责。
6、检测完毕后，根据相关规定正确处理废弃耗材以及扩增产物。
