―― 070040大肠埃希氏菌O157:H7生化鉴定盒(12种×10次)
一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的12种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三)出血性大肠杆菌O157:H7生化鉴定盒的详细使用方法
出血性大肠杆菌O157:H7为革兰氏阴性杆菌,需氧或兼性厌氧,有周鞭毛,并有菌毛,不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖,不发酵或迟缓发酵山梨醇;氧化酶阴性;MUG阴性。
从可疑肉汤培养物转接营养琼脂分离培养,将疑是肠杆菌科的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ), 37℃培养18-24h,用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
凡符合上述大肠杆菌O157:H7生化反应的纯菌落,经用抗E.coli O157:H7标准血清或EHEC O157:H7乳胶凝集试剂测试呈阳性结果,即可报告为该食品试样中检出肠出血性大肠杆菌O157:H7。