ATP技术用于表面清洁效果评价—关键问题答疑
发布时间：2023-03-21 浏览次数：996
来源：“六扇门Study”公众号 SIXDoors
ATP荧光检测技术因其具有操作简单、反应快速、便于现场检测的优点被广泛应用与清洁效果验证。也出现了许多使用误区及疑问，如：想用ATP快速检测代替表面涂抹微生物检测；不知限值如何设定，希望厂家给出参考；设定好的阈值是否可以通用？生产工厂环境那么多，哪些位点用ATP涂抹检测对于改善环境清洁效果比较有效？
这些问题一直困扰ATP的使用者，也不利于ATP技术的正确推广使用。针对以上困惑，小六查询资料，并请教使用者和ATP厂商，整理出以下内容，希望对大家有帮助。
1 ATP洁净度检测是否可以替代表面微生物涂抹检测？
不能！
无菌不代表洁净，洁净不代表无菌。
一切生物细胞中都存在ATP，包括食物参照及微生物。
首先，实际生产现场，设备清洗后大多数为食物残渣带来的ATP，微生物ATP只占一小部分。所以，ATP实际检测结果反映的不仅仅是微生物水平，而是包含食物残渣在内的总的“清洁状况”。
其次，一个微生物细胞中的ATP含量是远远低于ATP技术检测水平的。有研究表明，如果用ATP来测量纯菌液，以细菌为例基本也要达到10^3才能达到ATP的检测灵敏度，后面还需要设计标准曲线，随着不同的菌株选择需要测定不同的标准曲线，所以用ATP的方法来测菌浓度目前还停留在实验室的理想条件下可操作。
下图为微生物和食物残渣所含ATP含量。
2 不能替代微生物检验，用ATP还有啥意义？
ATP检测的作用是评估清洁度水平，这与微生物污染风险的增加是有关系的。
RLU值越高，间接代表微生物污染的几率越高。
此外，大家对“生产环境风险监测”的认识，大部分情况只用微生物标准去衡量清洗后的清洁度，这也是不对的！一个有效的环境监测方案需要将传统涂抹微生物检测、ATP、表面蛋白等结合起来加以利用。
3 食品加工区域那么多，ATP采样点如何选择？
在清洁作业区内或食品处理区域内，食品接触表面、临近表面或生熟交叉污染可能性较高的位置，宜增加采样点数量。
每个食品生产设备至少宜设置 5 个采样点，食品处理区至少宜设置 10 个采样点。
根据食品、餐饮加工过程对产品的风险将整个设施划分为四个区域。这四个区分别为：
一区 zone 1
食品、餐饮加工过程中产品风险最高的区域，包括食品处理区、清洁作业区或准清洁作业区内的食品接触表面。
二区 zone 2
食品、餐饮加工过程中产品风险低于一区的区域，包括食品处理区、清洁作业区或准清洁作业区内靠近一区的非食品接触表面。
三区 zone 3
食品、餐饮加工过程中产品风险低于二区的区域，包括食品处理区、清洁作业区或准清洁作业区内除了一区和二区外的其他区域。
四区 zone 4
食品、餐饮加工过程中产品风险最低的区域，包括食品处理区外的非食品接触表面和一般作业区。
4 每个区域ATP采样频率如何设置？
一区区域：宜每天（食品生产）或每周（餐饮加工）进行在每次清洗后或消毒后完成采样和检测。
二区区域：每周至少完成一次采样和检测。
三区区域：每 2 周至少完成一次采样和检测。
四区区域：每月至少完成一次采样和检测。
5 不同采样点位，如何操作采样？
人员手部：涂抹整个手掌和手指以及所有掌纹，来回涂抹手指间两次。
平整表面：涂抹10 cm ✕ 10 cm 的区域，随后更换方向再次Z字形涂抹，直至涂抹整个表面，所有折痕处来回2～3次加强涂抹。
镂空表面：涂抹表面，累积面积达100 cm^2，边缘、镂空处加强涂抹。
管状圆形接触面：在管口处，即1 cm - 5 cm 处一圈采样，用涂抹棒在内壁顺时针向内涂抹4圈，逆时针向管口涂抹4圈。
注意：对平坦、光滑、规则的食品接触表面直接涂抹 100 cm^2的面积；对凹凸、粗糙、弯折的操作表面应根据实际情况进行调整；当待采样表面面积不足 100 cm^2时，可以从多个同类型、同位置下进行涂抹采样，累计满足 100 cm^2作为 1 件样品。
6 重点来，大家最大的疑惑——限值确定方法
（1）每清洁一次，采集一次样品，每个采样点需要从清洁后的表面至少采集30次测试结果。
（2）数据收集后，应进行初步审查，排除任何可能扭曲结果的明显异常值（高 RLU 值），以确认数据集是可接受的。如果结果不稳定，说明清洗过程变化很大，应进行清洗过程检查并稳定结果。
（3）计算每个采样点可接受数据集的平均值和标准差。将平均值确定为合格值。平均值加上3倍标准差为不合格值。
其中3-6部分内容来自中国烹饪协会发布的团体标准T/CCA 029—2022《食品接触表面清洁效果评价 ATP 监测及限值要求》。
7 采用光电倍增管和光电二极管探测器的ATP荧光检测仪有何区别？
（1）性能方面，光电倍增管比光电二极管多了一步二次放大的功能，可以探测到极弱的光信号，相对灵敏度就会更高，稳定性更好。在拭子效果一致的情况下，采用光电倍增管的ATP荧光仪要比光电二极管的灵敏度要高很多，可以测量更低的污染物和ATP水平，则能发现极低的污染水平。
（2）价格方面，光电倍增管相比光电二极管要高很多。
具体如何选择，建议用户根据自己对性能和成本的要求，综合选择。
希望以上内容可以帮助到大家，如果大家还有与ATP技术相关的疑问，可留言哦！
