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产品名称：空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
英文名称：Multiplex Rapid Detection Kit for Campylobacter jejuni and Campylobacter coli (Fluorescent Probe Assays)
产品编号与包装规格：
| 编号 | 规格 |
|---|---|
| FZ030BF2 | 48 测试/盒 |
产品简介：本试剂盒适用于疑似污染的水果、蔬菜、水产品、水、牛奶、肉类等样本中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速定性检测。其他菌种检验需另按照国标GB 4789.9-2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验》开展。
检测原理：基于Real Time PCR技术，参照国家标准GB 4789.9-2025中针对于空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的特异性靶向基因的引物、荧光探针以及其他反应所需试剂，加入待检样品即可进行扩增反应。在发生扩增过程中，荧光探针与目的基因片段结合，可被Taq酶分解并产生荧光信号，此时荧光定量PCR仪可识别该荧光信号，同时根据其强弱变化绘制出相应的实时扩增曲线，进而判定空肠弯曲菌和结肠弯曲菌是否检出。
产品组分：
注：本产品不含空白对照，实验室应根据标准需求自行配置。
储存条件与保质期：-20℃避光储存，有效期为12个月，避免反复冻融。
灵敏度：最低检验限达到200 CFU/Test。
所需其他材料和适用仪器：荧光定量PCR仪 (具有能够检测FAM和VIC标记的荧光通道)、高速离心机、移液器、移液枪头及离心管等。
空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)使用指南：
1，样品前处理
1)样品增菌液模板DNA的制备：
a)参照GB 4789.9-2025要求，取25 g（mL）待检样品，置于225 mL弯曲菌增菌液中，微需氧条件，42℃±1℃增菌24 h±2 h；
b)取1 mL上述增菌液至1.5 mL无菌离心管中，12,000 r/min离心5 min，弃上清；
c)向管底沉淀中加入30 μL裂解液，充分重悬菌体，沸水浴或金属浴10–15 min；
d)12,000 r/min 离心 5 min，吸取上清液至新的离心管中，所得上清液即为待测样品DNA，该DNA溶液需置于冰上保存，长时间不用应再次离心，-20℃保存。
2)可疑菌落模板DNA的制备：
挑取可疑菌落，充分悬浮于预先加有30 μL裂解液的无菌离心管中，后按照上述步骤c)、d)操作。
2，加样、反应
按照需求取n个PCR反应管（n=1管阴性对照+1管空白对照+待检测样品数+1管阳性对照），从试剂盒中取出预混液，充分融化，涡旋后短暂离心，以上每管加入20 μL预混液，待用。
向上述n个反应管中分别加入阴性对照、空白对照、待测样品DNA、阳性对照各5 μL，总反应体积为25 μL。盖紧管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。
PCR反应体系为25 μL，结肠弯曲菌取FAM检测通道，空肠弯曲菌取VIC检测通道，在反应阶段2中60℃时收集荧光信号，具体程序如下：
注：在反应阶段2中60℃时收集荧光信号，FAM和VIC检测通道采集信号，淬灭基团选择“None”，染料校正选择“None”。
3）检验结果方法：
一般情况下，可通过软件自动设定的基线、阈值等直接读取检测结果。如需调整，可根据所使用仪器的自身情况（如噪声等）以及选取的不同荧光通道进行调整。
质量控制：阴性对照和空白对照未出现明显的S型扩增曲线或Ct值 ≥ 40，阳性对照出现S型扩增曲线且其Ct值 < 30。若阴阳性对照和空白对照不同时满足上述条件，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。
结果判读（根据反应所得Ct值判读，具体见下表）：
空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)使用注意事项
实验环境条件和过程控制应参照GB/T 27403《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》规定执行。
使用本试剂盒前请仔细阅读本说明书全文，检测过程中建议穿洁净工作服，戴一次性手套，使用的移液枪头需提前灭菌。
试剂盒中试剂使用前需充分融化、混匀，短暂离心后使用，期间需尽量避免产生气泡，加样完毕后检查反应管是否盖紧，避免泄露造成污染。
待检测样品基因变异可能会造成假阴性结果；待检测样品交叉污染、实验室环境污染以及试剂污染均会造成假阳性结果。
不同批号的产品请勿混合使用，请在产品有效期内使用试剂盒，由于操作不当引起的误判，以及由此误判引发的其他事项，本公司概不负责。
检测完毕后，根据相关规定正确处理废弃耗材以及扩增产物。
