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Simple Cloning T-vector(pSC-T) (规格:20次×5 | 货号:HKT001-01B)

英文名称:Simple Cloning T-vector(pSC-T)

货 号 :HKT001-01B

规 格 :20次×5

用途:专用 T 载体

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产品名称:Simple Cloning T-vector(pSC-T)

产品编号与包装规格:

编号产品名称规格产品介绍价格
HKT001-01BSimple Cloning T-vector(pSC-T)20次×5
T载体2398

产品描述:
      Simple Cloning T-vector(pSC-T)是一种 PCR 产物高效 TA 克隆的专用 T 载体,本载体消除了 PCR 产物插入区域两侧的 多克隆位点。
      在 PCR 克隆构建过程中,为了进一步的克隆步骤,常会 在PCR 产物的两端引入专门的酶切位点,如 T 载体上已带有 相同的酶切位点,会对下一步的酶切连接带来不利的影响。为 消 除 多 克 隆 酶 切 位 点 带 来 的 负 作 用 , Simple Cloning T- Vector去除了PCR 产物插入区域两侧所有的酶切位点。带有酶 切位点的 PCR 产物克隆后进行酶切时,T 载体上不会有相同 的酶切位点影响酶切反应,可以大大提高酶切效率,增加亚 克隆成功率。多克隆位点的消除并不影响 β-半乳糖苷酶的正 常表达,PCR 产物克隆后仍可以利用 α-互补性进行蓝白斑筛 选,挑选阳性克隆。
      由于本载体上消除了多克隆酶切位点,在 PCR 扩增引物设 计时需要考虑导入合适的酶切位点。

Simple Cloning T-vector(pSC-T) 产品包装(A包装):

Simple Cloning T-vector(pSC-T) 产品包装(A包装)

操作方法:
      1) 选择合适的连接体系(详细介绍见背面)。
      2) 取10μL 加入至 100μL 感受态细胞中,用移液 枪吹打混合,冰上放置30 分钟。
      3) 将离心管置于 42℃水浴中,热击 60-90 秒,迅 速将离心管置于冰上,放置 2-3 分钟。
      4) 向每个离心管中加入 500μL 无菌不含抗生素的 LB 或SOC 培养基中,37℃摇床,150rpm 振荡培养 45 分钟,使质粒上氨苄抗性基因表达,菌体复苏。
      5) 吸取200μL 已转化的感受态细胞,加到含氨苄 青霉素的 LB 或SOC 固体平板上,用无菌涂布棒将细 胞均匀涂开,将平板置于 37℃培养箱里直至液体完全 吸收,倒置培养 12-16 小时。
      6) PCR检测,利用试剂盒自带的高速PCR扩增试 剂2×FastTaq Mast Mix直接进行菌落PCR鉴定。

pSC-T 结构图