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GB4789.2 菌落总数测定稀释度制备选取技巧

发布时间:2022-12-28    浏览次数:446

10倍(10-1)稀释度的制备

在《GB4789.2-2022食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》中,第6点“菌落总数的检验程序”中“检样”步骤是25g(mL)+225mL稀释液,制成10倍稀释度,也即10-1。在“6.1.5根据对样品污染状况的估计,择1个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液)”在这里说明,液体样品可包括原液。那么问题来了,当我们做选取原液、10倍两个稀释度时,怎么操作呢?是接原液和25mL+225mL稀释液吗?如果这样操作,原液和10倍两个稀释度的误差会很大,操作也比较麻烦。

在实践过程中,当我们样品是液体时,10倍稀释度应该取1mL+9mL稀释液,而不是25mL+225mL。这样既方便,又准确。只有固体、半固体样品才需要按照25g+225mL制备10倍稀释度。

论坛网友14795546112(夫唯不争)观点:

关于配制10-1稀释度那个配制,我们做实验的时候会明显觉得10-1稀释度的结果明显不是10-2稀释度结果的10倍,有时候还会差得有点明显,这些都是系统误差和人的操作造成的,所以我还是建议按照25+225,而且25是1次就量取好不要搞什么10+10+5甚至更多次。如果都是用移液枪的话感觉可以考虑这个方法,移液管的就算了,还是按照标准方法来。

选取适宜稀释度(如何选取适宜稀释度呢?)

在“6.1.5根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液)”这里说了,“对样品污染状况的估计”,怎么样估计才准确呢?如果能估计的话,那还用检测吗?“选择1个~3个适宜稀释度”,到底选择1个,2个,还是三个呢?很多检验员未必搞清楚。

在实践过程中,我们总结了经验。这个“对样品污染状况的估计”可以根据产品标准的要求和企业内控指标要求进行选取即可。这个怎么理解呢?根据GB4789.2-2022,菌落计数是选取菌落数在30-300之间的平皿进行计数。结合产品标准要求,以能出检测报告为依据。

我们检测样品的菌落数的目的是看看样品的菌落总数是否超标。所以,应以稀释度最低的平皿的菌落数能检测超标的即可。

例如,某食品菌落总数要求是:n=5,c=2,m=10000,M=100000。我们假设最低稀释度平皿上长了300。那么,10000/300=33,两位数。即最低稀释度选取10-2即可,这样稀释度选10-2、10-3即可。

假如10-2上菌落数超过300,即多不可计了。那么,至少是100*300=30000,已经大于m=10000。检出3个大于30000的,可判超标。

如果最低稀释度上菌落数小于30或者无生长。那么,检测结果也是合格的。

例如,最低稀释度上无菌落生长,可报告<100。如果有生长,直接报告实数即可,结果也合格。

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来源:“食品微生物检测公众号好友“莫明其妙老师原创分享,转载请注明来源。