滤膜过滤法在医疗中测定菌落总数的应用！
发布时间：2023-06-13 浏览次数：745
文章转载于“金坛第一人民医院公众服务号”，作者：感染管理科
原标题：【检测升级】滤膜过滤法—菌落检测大升级
2021年6月，我院感染管理科正式采用滤膜过滤法进行内镜洗脱液、透析用水、透析液、口腔用水的细菌检测，实现了菌落检测方法的升级。
01 为什么要使用滤膜过滤法？
GB15982-2012《医院消毒卫生标准》内镜的检查方法中关于内镜清洗消毒后的检查方法明确要求使用“滤膜法过滤”。
而我院一直使用的是传统的涂布法，涂布法采集的液体样本量较少，接种于培养皿中的样本量少，导致细菌培养结果代表性不高。因此我院按照国标要求，使用滤膜过滤法进行菌落检测，以提高细菌培养结果的代表性。
02 什么是滤膜过滤法？
是使用真空泵负压抽滤，在滤杯内的灭菌微孔滤膜上下面产生压差，使滤杯内的洗脱液由于压差作用通过灭菌微孔滤膜，使得微生物被拦截在灭菌微孔滤膜上。
规范中要求使用孔径0.45μm的滤膜，可拦截直径0.45μm以上的微生物（绝大多数细菌的直径大小在0.5μm ~5μm之间），从而高效地拦截微生物，更准确地检测样本中的菌落数。
03 滤膜过滤法的操作流程
以内镜洗脱液为例
1. 用物准备
清洗消毒后胃镜、50ml洗脱液、一次性注射器（50ml、2.5ml）、微生物检测仪、滤膜、滤杯、无菌手套、速干手消毒剂、无菌镊子、培养皿等。
2. 仪器组装
先后用75%酒精及灭菌水清洗消毒微生物检测仪，然后关闭通气阀门，组装滤杯及滤膜。
3. 采样样本接种
将收集的50ml洗脱液，其中2ml洗脱液分别接种2个营养琼脂平板，剩余的48ml洗脱液倒入滤杯中，打开通气阀门，等洗脱液被抽干后关闭通气阀门。卸下滤杯后，用无菌镊子取出滤膜，将滤膜接种在凝固的营养琼脂平板上（注意不要产生气泡）。
4. 培养条件
置于37℃培养箱培养48小时，计数菌落数。
采用滤膜法检测的样本合格率可能远低于传统采样法，但又能较为客观地反映内镜的清洗消毒质量。
其原因包括50mL洗脱液能够比10mL洗脱液更充分地接触到消毒内镜的内表面，滤膜过滤时能够将洗脱液中的微生物高效拦截且对微生物的损伤较小，利于微生物的培养，得到更准确的菌落计数结果。
因此，滤膜法能够更加灵敏、可靠地评价内镜的清洗消毒工作，更进一步保护内镜检查患者的安全，提高医疗质量。
滤膜过滤法不仅可以用于内镜洗脱液的细菌量检测，也可用于透析用水、透析液、纯化水等的检测，我院感染管理科会致力于按照国家规范，利用先进仪器提高细菌检测质量，发现医院重点部门隐藏的问题，保证患者医疗安全。
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