GB 4789.4-2024沙门氏菌检验标准变更要点汇总
发布时间：2024-03-14 浏览次数：295
来源：“六扇门Study”公众号，作者~SIXDoors
2023年4月，GB4789.4-2024标准终于发布啦！以下是24年版沙门氏菌检验标准变更要点内容：
重点变更1：“乳粉样品从混匀，改用室温浸泡1小时后再进行预增菌”
标准修改原因：
乳粉经过高温喷雾干燥，其中的沙门氏菌都处于受损状态；乳粉水活度低，其中幸存的沙门氏菌适应了干燥的环境。如果乳粉在BPW中快速混匀迅速水化，受损的沙门氏菌会出现渗透压休克；乳粉在BPW中室温浸泡1小时缓慢水化，受损的沙门氏菌可以得到复苏。
标准的修订过程做了大量验证实验，如：人工模拟热损伤沙门的乳粉浸泡法与混匀法比对试验，结果表明浸泡法的检出率更高。
自然污染了山夫登堡沙门氏菌的大豆粉，大豆粉也经过了高温喷雾干燥，水活度较低，与乳粉类似。
结果表明，浸泡法阳性率90%， 混匀法阳性率60%，BPW 44℃预温后再混匀的阳性率只有40%。
操作注意事项：
✨将乳粉轻轻缓慢倾倒在BPW的液面；
✨勿混匀勿调节pH，室温静置60 min±5min；
✨静置完后再混匀，培养；
✨BPW勿预温。
重点变更2：选择性增菌培养基，采用RVS 代替 SC
标准修改原因：
亚硒酸盐胱氨酸增菌液SC主要适用于伤寒沙门氏菌的选择性增菌；但通过疾病监测发现，我国伤寒与副伤寒的发病率逐年下降，目前发病率为0.8 /10 万。
然而，非伤寒沙门氏菌发病率高达560 /10 万（《我国零售鸡肉中非伤寒沙门氏菌污染对人群健康影响的初步定量风险评估20210526》），在微生物引发的食源性疾病中排前2位。
从培养基成分差异来看，RVS中含有孔雀绿，能够抑制非沙门氏菌的生长，大豆蛋白胨有利于沙门氏菌的复苏；SC增菌液配置需要亚硒酸氢钠，其具有一定毒性，健康环保方面也存在安全风险，且原料不稳定，受温度影响较大，容易变性而造成培养基功能失效 。送上两种培养基的配方成分：
亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：蛋白胨 5.0g，乳糖 4.0g，磷酸氢二钠 10.0g，亚硒酸氢钠 4.0g，L-胱氨酸 0.01g，蒸馏水 1000mL。
氯化镁孔雀绿大豆胨（RVS）增菌液：大豆蛋白胨 4.5 g，氯化钠 7.2 g，磷酸二氢钾 1.26 g，磷酸氢二钾 0.18 g，氯化镁（含 6 个结晶水） 28.6 g，孔雀绿 0.036 g，蒸馏水 1 000 mL。
操作注意事项：
1、用RVS代替SC，BPW的接种量改为0.1mL，选择性增菌温度为42 ℃±1 （主要是减少带入到RVS中的背景菌）；
2、RVS的质量很关键，培养基要谨慎选择。
重点变更3：TTB选择性增菌改为：低背景菌36 ℃±1 ℃，高背景菌42 ℃±1 ℃
标准修改原因：
1、验证试验发现，对于生鲜样品，TTB 42 ℃比TTB 36 ℃的选择性好，所以继续沿用；
2、验证试验发现，对于深加工样品，TTB 36 ℃比TTB 42 ℃生长好，所以低背景菌采用36 ℃±1 ℃培养；
3、相关权威方法，如BAM中一直有相关规定。
操作注意事项：
1、将BPW接种到TTB后，一定要混匀；
2、TTB基础煮沸杀菌，使用当天再加碘液和煌绿；
3、绝大部分预包装食品是低背景菌，生禽肉等初级农产品属于高背景菌样品；
4、背景菌不明的样本，如PT样品， 36 ℃±1 ℃和42 ℃±1 ℃两个温度同时培养。
重点变更4：预增菌培养物、选择性培养物可4℃冷藏不超过72h
修改原因是：
1、 验证发现，预增菌培养物、选择性培养物4℃冷藏不超过72小时，不会影响后续检验。
2、 相关权威方法，如ISO 和BAM中都有相关规定。
3、减少周末加班！
