GB4789.2-2022新标准常见问题解答
发布时间：2022-12-23 浏览次数：2185
来源：六扇门Study
GB4789.2-2022自8月发布后，标准的使用者们都在研究领会新标准的变化，许多培训机构、厂商也都举办了系列培训班。这期间，也冒出许多问题哦，小六收集了一些在线培训过程大家提出的问题，汇总了20个比较常见的，并给出参考答案，供大家参考哈。
有回答不到位的，欢迎小伙伴们补充及指正哈！有新的问题，也欢迎留言提出！
问题1：GB4789.2培养条款中，规定水产品30°C±1°C培养72ｈ±3ｈ，这里的水产品具体指什么？有具体的文件或者标准条款支持吗？
答：水产品为带有原生菌群，未通过加工工艺的水产品。凡经过腌制，熟制等加工的属于水产制品，不属于水产品，具体可参照GB2760-2014的分类系统。
问题2：我们实际工作中，覆盖一层培养基后还是会有蔓延整皿的情况，新国标删除了“报告菌落蔓延”的条款，这种情况我们如何处理呢？
答：可以数不蔓延的一半或者四分之一，报告时如25*2/4，代表计数的一半或四分之一平板。
问题3：如果覆盖4mL平板计数琼脂培养基后还是没有办法抑制某些菌蔓延的话该怎么处理？
答：没更好的办法处理，这类情况一般都是样本中含有芽胞菌，就是蔓延菌落。计数可参考问题2。
问题4：粘稠的液体样品用天平称取还是用吸管吸取比较好？
答：看产品标准要求，无要求建议天平（精确小数点后一位即可）称取，更准确，以CFU/g报告检测结果。
扩展一下：国际上，一般粘度大于牛奶的按照固体样本处理。
问题5：液体样品直接检测原液呢，是不是就不符合检验步骤了呢？
答：符合，标准中指出液体可以从原液开始，这样更接近真实结果。
问题6：倾注培养基，琼脂温度一直是控制在手能接受的温度，这样做可以吗？
答：首先，建议水浴锅保温，水浴锅设定在48℃，水温恒定即可；其次，采用虎口能接受的温度，而不是手。
问题7：一些样品倾注后，平板底部有白色沉淀和颗粒存在，长菌后不好鉴别结果，有没有好的方法判断？
答：一种方法：建议使用带过滤功能的均质袋，尽可能的过滤掉残渣；另一种方法，可以使用测试片对样本进行检测，计数红色菌落，白色颗粒残渣不显色。
问题8：如果第一稀释度两个皿都没有长，第二稀释度确长了菌，这是什么原因？
答：一种情况是样本中可能存在抑菌成分，建议多做2个稀释梯度，保障结果准确性。
问题9：那同一个稀释度一个平板在是计数范围内，另一个平板不在范围内，还是报告同一稀释度的两个平板的平均值吗？
答：都可以 ，实验室自己规定，建议取平均值更贴近真实值。
问题10：有抑菌成分的产品，越稀释越有菌，那怎么处理或者重新做样呢？
答：不会一直越稀释越有菌的，从梯度正常的稀释度开始计数即可。
问题11：10稀释度的两个平板分别长了2和3个菌落，最后结果是报告25还是30？
答：25，建议看看标准中菌落计数案例。
问题12：两块平行板的菌落数目偏差要求是多少？
答：没有具体要求，目测偏差太大，会认为均质有问题。
问题13：测试片和平板倾注法检测结果差异大，取决那个结果判定？
答：建议以平板倾注法检测结果为准，不同品牌的测试片依然会受样本适用范围的影响。
问题14：请问增加了测试片法 还需要做方法验证吗？
答：首先，关于方法验证（Validation）如果厂家提供了充分的验证报告，直接采纳验证报告的结果即可，原则上不需要再进行系统化的验证，可以选择1-2个基质进行比对验证。其次，实验室需要做的是方法确认（Verification），如：使用定量标准物质开展实验确认或者通过其他实验室质控手段证明。
问题15：所选择的测试片，主要营养成分与平板计数琼脂培养基成分配方一致，是什么意思？
答：主要营养成分一致即符合，主要成分包括：胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖，至于其他成分如显色剂、冷凝胶等各品牌配方可能会有差异。
问题16：之前检测样本，采用平板法和测试片法比对，测试片检测结果偏低，为什么？
答：一种情况，可能选择测试片生长率偏低，建议按照GB4789.28做好验收；另一种情况，平板法中样品的细小残渣计数时会被误当做是菌落计数，而这些细小样本残渣在测试片上是不显色的。
问题17：平板法和测试片偏差多少属于符合？
答：可参照ISO16140-2，要求：由差值计算的β容忍区间在±0.5log之内。
问题18：水化后的快速菌落测试片放置多长时间后在进行划线会比较好？我们按照GB4789.28进行验收的时候用菌液进行划线培养基容易粘在接种环上？
答：如果参照附录E验收，建议水化至少1小时以上，8小时以内。大家也可参照附录D选择参比TSA培养基，PR值PR≥0.7。
问题19：CNAS和CMA变更 是否需要做方法确认？
答：涉及到技术参数的需要做方法确认（人、机、料、法、环），如使用测试片。
问题20：如果不使用测试片， CNAS做方法变更需要做这部分确认实验吗？
答：如果不使用测试片，可以不做方法证实及实验确认，在填写变更申请表时，表格有一个特定的条款，在里面填写不用测试片即可。
