沉降菌、浮游菌监测点设置相关法规简洁整理篇！
发布时间：2023-01-16 浏览次数：2108
USP29-1116
| 表1 基于控制环境重要性的建议取样频率 | |
| 样地面积 | 取样频率 |
| 洁净级100或更好的设计室 | 每个操作交接 |
| 刚靠近洁净级100的支持区 (如10,000洁净级) | 每个操作交接 |
| 其它支持区(100,000洁净级) | 每周两次 |
| 潜在的产品/容器接触区 | 每周两次 |
| 其它无菌操作区但非产品接触区支持区(100,000洁净级或较低) | 每周一次 |
由于操作过程中手工介入的增加以及人员接触产品潜在性的增加，使得环境监测程序的相对重要性增加。
环境监测对于无菌操作生产的产品来说，远比生产后进行终端灭菌的产品要重要得多。
确定和定量对后继灭菌处理具有抗性的微生物，远比在制造环境周围进行微生物环境监测要重要得多。
如果终端灭菌循环不是基于过度杀伤循环，而是基于生物负担优先灭菌，那么生物负担的评估就是关键性的。
取样策略应当是动态性的，即监测频率和取样策略位置的动态性。其动态调整是以趋势特征为根据的。根据这一趋势可以进行适当的增加或减少取样。
医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法
GB/T 16294-2010
5.4 沉降菌计数
5.4.1 采样点数目及其布置
5.4.1.1 最少采样点数目
沉降法的最少采样点数可按表2确定。
| 表2 最少采样点数目 | |||
| 面积m² | 洁净度级别 | ||
| 100 | 10 000 | 10 0000 | |
| <10 | 2～3 | 2 | 2 |
| ≥～<20 | 4 | 2 | 2 |
| ≥～<40 | 8 | 2 | 2 |
| ≥40～<100 | 16 | 4 | 2 |
| ≥100～<200 | 40 | 10 | 3 |
| ≥200～<400 | 80 | 20 | 6 |
| ≥400～<1000 | 160 | 40 | 13 |
| ≥1000～<2000 | 400 | 100 | 32 |
| 2000 | 800 | 200 | 63 |
注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面面积，对非单向流洁净室是指的房间面积。
在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见表3。
| 表3 最少培养皿数 | |
| 洁净度级别 | 所需∅90mm培养皿数（以沉降0.5h 计） |
| 100 | 14 |
| 10 000 | 2 |
| 100 000 | 2 |
| 300 000 | 2 |
5.4.1.2 采样点的布置
采样点的位置可以同悬浮粒子测试点。
（a）工作区采样点的位置离地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。
（b）可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。
洁净室施工及验收规范 GB 50591-2010
E.8 悬浮微生物的检测
E8.3 沉降菌检测应符合下列要求：
1、使用直径90mm(φ90)的培养皿采样。当采用其他直径培养皿时，应使其总面积和φ90皿总面积相当。
2、培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基，必须留样作阴性对照。
3、培养皿表面应经适当消毒清洁处理后，布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点。在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方。
4、当用户没有特定要求时，培养皿应布置在地面及其以上0.8m之内的任意高度。
5、每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿。
6、动态监测时也可协商布点位置和高度。
7、培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数，如工艺无特殊要求应大于等于表E.8.3中的最少培养皿数，另外各加一个对照皿。
GMP附录 一 无菌药品
第十一条 应当对微生物进行动态监测，评估无菌生产的微生物状况。监测方法有沉降菌法、定量空气浮游菌采样法和表面取样法（如棉签擦拭法和接触碟法）等。动态取样应当避免对洁净区造成不良影响。成品批记录的审核应当包括环境监测的结果。
对表面和操作人员的监测，应当在关键操作完成后进行。在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。
| 表4 洁净区微生物监测的动态标准 | ||||
| 洁净度级别 | 浮游菌 cfu/m³ | 沉降菌（90∅mm） cfu /4h | 表面微生物 | |
| 接触（∅55mm） cfu /碟 | 5指手套 cfu /手套 | |||
| A级 | ＜1 | ＜1 | ＜1 | ＜1 |
| B级 | 10 | 5 | 5 | 5 |
| C级 | 100 | 50 | 25 | — |
| D级 | 200 | 100 | 50 | — |
注：（1）表中各数值均为平均值；（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。
第十二条 应当制定适当的悬浮粒子和微生物监测警戒限度和纠偏限度。操作规程中应当详细说明结果超标时需采取的纠偏措施。
欧盟《GMP》附录1 无菌药品生产2008版
17、下表列出了各级区内示例性生产操作（可参见第28条至第35条）
| Grade | 最终灭菌产品的生产操作（参见28 — 30条） |
| A | 高污染风险产品的灌装 |
| C | 高污染风险药液的配制，药液的灌装 |
| D | 灌装前原辅包装材料的准备、药液的配制 |
| Grade | 无菌操作（参见31 — 35条） |
| A | 无菌配制和灌装 |
| C | 过滤前药液的配制 |
| D | 清洁后原辅包装材料的处理 |
当实施无菌操作时，应经常的对微生物进行动态监测，监测方法有沉降碟法、定量空气采样法和表面取样法（如：药签擦拭法和接触碟法）等。动态取样须避免对洁净区造成不良影响。
在成品批档案审核，应同时考虑环境监测的结果，决定是否放行。
表面和操作人员的监测，应在关键操作完成后进行。
除生产操作之外，还需进行其他微生物监控，例如在系统验证、清洁和消毒操作后。
19、洁净区微生物监控的动态参考标准如下：
| 微生物污染限度参考标准 | ||||
Grade级别 | (空气样) cfu/m³ | 沉降碟(∅90 mm) cfu/4h (b) | 接触碟(∅55 mm) cfu/碟 | 5指手套 cfu/手套 |
| A | ＜1 | ＜1 | ＜1 | ＜1 |
| B | 10 | 5 | 5 | 5 |
| C | 100 | 50 | 25 | — |
| D | 200 | 100 | 50 | — |
注：(a)表中各数值均为平均值； (b) 单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时。
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