致泻大肠埃希氏菌检验将有新变化！新标准征求意见稿发布，速来掌握要点

发布时间：2026-05-20 浏览次数：11 分享：

食品安全国家标准又迎新进展！《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》（GB 4789.6）征求意见稿正式发布，这意味着致泻大肠埃希氏菌的检测方法、判定标准或将迎来重要调整。作为食品微生物检测领域的核心项目之一，新标准有哪些关键变化？对日常检测工作又有多少影响？一文带您抢先解读，速来学习！

《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》（GB 4789.6）征求意见稿

一、增菌条件优化，灵敏度大幅提升

这是本次修订中最基础但是也最关键的变化，直接关系到能否”抓“到目标菌。

GB 4789.6新旧标准增菌条件对比

旧标准痛点：2016版中，10 μL前增菌液接种量及未经预热的营养肉汤培养基，经实验验证不能满足方法检测灵敏度要求，极易导致漏检。

新标准方案：

预热要求：225mL营养肉汤（环凯货号022010）必须提前预热至36℃±1℃。
接种量调整：接种量由10μL调整至1mL。

您的应对：实验室需调整水浴锅温度设置，并规范移液操作。这一改动显著提高了检测的灵敏度，是防止“假阴性”的第一道防线。

二、技术路线双轨并行，引入”实时荧光PCR“作为第一法

新标准确立了分子生物学的主导地位，检测防范从单一的普通PCR升级为”实时荧光PCR”与“普通PCR”并行，且将”荧光PCR“列为第一法。

比较项目	旧标准（2016版）	新标准（2026征求意见稿）	优势解析
首选方法	普通PCR	实时荧光PCR（qPCR）	无需电泳，闭管检测，防污染，速度快
检测指标	escV, bfpB, lt, stp, sth, aggR, stx1, stx2, ipaH, uidA 等 10 基因	同样覆盖 10 基因，但体系更优	包容性和排他性均达 100%，结果更稳
操作流程	繁琐，需开盖电泳	简便，自动化程度高	适合大批量样品筛查，减少人工误差

技术意义：使用该方法，可在减少工作量的同时节省检测时间，实验室可根据条件选择实时荧光PCR或普通PCR进行确认。

针对毒素基因分型检测，可使用环凯五种致泻性大肠埃希氏菌核酸多重检测试剂盒(PCR-荧光探针法)（FZ022BF2）。

实时荧光PCR或普通PCR进行确认

三、基因“瘦身”行动，删除4个非核心/争议基因

被删除的4个基因及其理由：

1、eae 基因（删除理由）：数据显示，携带 eae 的菌株均同时携带 escV。且普通 PCR 对 eae 的检出率极低（仅15.38%），而对 escV 检出率高。判定逻辑变更： EPEC/EHEC 的判定将不再依赖 eae，而是以 escV 和 bfpB 为核心。

2、invE 基因（删除理由）：针对 1504 株分离株的测序发现，6 株 EIEC 均携带 ipaH，仅 1 株携带 invE。若仅靠 invE 判定，将导致大量漏检。判定逻辑变更： EIEC 判定以 ipaH 为唯一依据。

3、astA 基因（删除理由）：存在学术争议。监测数据显示，仅携带 astA 单基因的菌株比例高达 30%~60%，且其作为 EAEC 特征基因的卫生学意义存疑。判定逻辑变更： EAEC 判定以 aggR 为准。

4、pic 基因（删除理由）：pic基因不是大肠埃希氏菌的特征性基因，在志贺氏菌和沙门氏菌中也有一定比例检出。全基因组测序分析比对结果显示，ATCC25922中也携带pic基因。目前，没有明确性的证据表明pic与人类的腹泻病相关。

四、普通PCR方法stp引物重新设计

核心变化：重新设计了stp引物。上游引物的其中两个点位“AC”修改为“WM”

GB 4789.6-2016：

GB 4789.6-2016 stp引物

征求意见稿：

GB 4789.6（征求意见稿） stp引物

技术意义：通过对stp基因序列进行NCBI blast比对分析，发现原上游引物两个相关位点存在突变。为避免因引物序列位点突变造成漏检，新标准重新设计了stp引物，确保ETEC检出准确性。

五、生化鉴定升级，新增“葡萄糖铵”确证

为了弥补分子检测可能存在的盲区（如死菌DNA干扰），新标准引入了更严谨的生化鉴定流程。

新增内容：当uidA阴性时，经质谱（MALDI-TOF MS）鉴定为大肠埃希氏菌的菌株，需补做葡萄糖铵试验阳性方可最终确认

需补做葡萄糖铵试验阳性

技术意义：多重验证为致泻大肠埃希氏菌的精准判定增加关键生化依据，有效避免分子检测盲区导致的误判风险。

对实验室的提示

1、设备准备：需配备实时荧光PCR仪或普通PCR仪、低温高速离心机、MALDI-TOF MS等设备

2、试剂更新：按新标准重新验证PCR引物、探针及反应体系

3、人员培训：针对标准新操作、新增荧光PCR方法等判定规则开展培训

4、方法验证：标准正式发布后，需按GB 4789.6进行方法验证

总结：标准落地在即，提前掌握变化，才能从容应对。建议各食品微生物实验室密切关注标准动态，及时做好技术储备和方法转换准备。

环凯GB4789.6（征求意见稿）致泻大肠埃希氏菌检验检验产品解决方

用途	产品类型	货号	名称	规格
增菌	干粉	022010	营养肉汤	250g/瓶
	即用型	22010D1	营养肉汤	225mL×10袋
	干粉	022160	肠道菌增菌肉汤	250g/瓶
	即用型	C22160D2	肠道菌增菌肉汤	30mL×10袋
分离	干粉	022144	麦康凯琼脂	250g/瓶
	即用型	024076	麦康琼脂平板	90mm×20个/盒
	干粉	022060	伊红美蓝琼脂培养基（EMB）	250g/瓶
	即用型	024087	伊红美蓝琼脂培养基（平板）	90mm×20个/盒
纯培养	干粉	022020	营养琼脂(羊血琼脂基础)	250g/瓶
	颗粒	022020P1	营养琼脂(羊血琼脂基础)	250g/瓶
	即用型	024089	营养琼脂平板	90mm×20个/盒
	即用型	CP0150	营养琼脂斜面（NA）	20支/盒
生化鉴定	干粉	022080	三糖铁琼脂	250g/瓶
	即用型	CP0080	TSI琼脂斜面	20支/盒
	即用型	029010	革兰氏染色液	10mL×4支/盒
	即用型	029172	氧化酶试剂	2.5mL/瓶，约50测试
	干粉	026050	半固体琼脂	250g/瓶
	即用型	C26050G1	半固体琼脂	5mL×20支
	干粉	023090	尿素琼脂（pH 7.2）	250g/瓶
	配套试剂	029100	40%无菌尿素溶液	10支/盒
	即用型	075150	尿素生化鉴定管	10支/盒
	即用型	075330	氰化钾生长试验管	20支/盒
	即用型	075340	氰化钾对照管	20支/盒
	干粉	024053	脑心浸出液肉汤(BHI)	250g/瓶
	即用型	024053A	脑心浸出液肉汤管	10mL×20支/盒
	干粉	023150	葡萄糖铵培养基	100g/瓶
	试剂盒	071760	致泻大肠埃希氏菌生化鉴定试剂盒	5种×10次
PCR确认	多重PCR检测试剂盒	KJD02P	EPEC-STEC-EHEC多重PCR检测试剂盒	24测试
		KJD03P	EAEC多重PCR检测试剂盒	24测试
		KJD04P	ETEC多重PCR检测试剂盒	24测试
		KJD05P	EIEC多重PCR检测试剂盒	24测试
		KJY010	细菌 DNA快速提取试剂盒	50次/盒
		FZ022BF2	五种致泻大肠埃希氏菌核酸多重检测试剂盒（PCR-荧光探针法）	48测试
质控菌种	阳性对照	GDMCC1.2953	肠道出血性大肠埃希氏菌EHEC	1支冻干菌+1支复苏液
		GDMCC1.3004	肠道集聚性大肠埃希氏菌EAEC	1支冻干菌+1支复苏液
		GDMCC1.2987	肠道侵袭性大肠埃希氏菌EIEC	1支冻干菌+1支复苏液
		GDMCC1.2834	肠道致病性大肠埃希氏菌EPEC	1支冻干菌+1支复苏液
		GDMCC1.2970	产肠毒素大肠埃希氏菌ETEC	1支冻干菌+1支复苏液
	阴性对照	FSCC149005	大肠埃希氏菌	1支冻干菌+1支复苏液

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